L’ARN NucleoSpin8/96 pour la purification automatisée de l’ARN total provenant de cultures et tissus cellulaires animal ou humain, combine la lyse stringente de guanidine-isothiocyanate avec la digestion efficace de l'ADN génomique grâce au traitement de la DNase I et de la vitesse de la technologie de la membrane de silice. L’ARN 8/96 NucleoSpin permet d’obtenir une qualité d'ARN uniforme, des rendements reproductibles de l’ARN et des procédures à rendement élevé sans contamination croisée. Par conséquent, les kits ARN 8/96 NucleoSpin sont des produits puissants, comme par exemple pour l'analyse microarray, en ce qui concerne le profilage de l'expression génétique, la découverte de médicaments et les diagnostics moléculaires (voir les données d'application). Les kits permettent la purification de l’ARN total jusqu’à 107 cellules ou jusqu’à 30 mg de tissus (traitement par centrifugeuse). La conception unique de la barrette à 8 puits/plaque à 96 puits des systèmes ARN 8/96 NucleoSpin permet un séchage entièrement automatisé du module de liaison à l'ARN avant le chargement du tampon d'élution et diminue la pulvérisation. À l’aide de la méthode ARN 8/96 NucleoSpin, les cellules ou les tissus sont lysés par incubation dans une solution contenant de grandes quantités d'ions chaotropiques (les cellules peuvent être cultivées et directement lysées dans des plaques de culture cellulaire à 96 puits). Ce tampon de lyse désactive immédiatement les RNases et crée des conditions de liaison appropriées qui favorisent l'adsorption d’ARN sur la membrane de silice de la barrette de liaison à l'ARN 8/plaque de liaison à l'ARN 96 NucleoSpin. L’ADN contaminant, qui est également lié à la membrane de silice, est éliminé par la DNase I qui est directement appliquée à la membrane pendant la préparation (la DNase I est fournie avec les kits). En raison de l'activité spécifique élevée de la DNase I, un traitement de seulement 15 min à température ambiante suffit pour éliminer efficacement l'ADN contaminant. Les sels, métabolites et composants cellulaires macromoléculaires sont éliminés par des étapes de lavage simples à l’aide de trois tampons différents. L'ARN pur est finalement élué dans des conditions de faible force ionique avec de l'eau exempte de RNase (pH 8,0 à 8,5).
Composants du kit
: kit ARN NucleoSpin 8 - barrettes de liaison à l'ARN NucleoSpin, plaques de lavage MN, blocs à puits carrés MN, racks avec barrettes de tube, barrettes de bouchons, Plaques d'élution avec fond en U, feuille de métal auto-adhésive, tampons, DNase I exempte de Rnase, kit ARN NucleoSpin 96 - Plaques de liaison à l'ARN NucleoSpin, plaques de lavage MN, blocs à puits carrés, bloc de puits ronds (bas), plaques d'élution avec fond en U, feuille de métal auto-adhésive, tampons, DNase I exempte de RNase
Isolement manuel ou automatisé de de l’ARN total provenant de cellules et de tissus de culture, échantillons de salive prélevés avec Oragene.
Concentration : 50 à 200 ng/μl
Format : Barrette de 8 puits
À utiliser avec (application) : Pour l'isolement manuel ou automatisé de l'ARN total
Nbre de réactions : 12 x 8
Type de produit : ARNm NucleoTrap™ 8
Quantité : 1 de chaque
Heure du test : 45min.
Rendement : 20μg
