Couplage covalent des anticorps et d’autres protéines via des amines primaires (-NH2) pour la purification par affinité avec ces billes d’agarose activées par l’aldéhyde.
Les kits et la résine de couplage Thermo Scientific™ AminoLink Plus utilisent des billes d’agarose activées à l’aldéhyde pour le couplage covalent à haut rendement d’anticorps (protéines) via des amines primaires pour la préparation de colonnes de purification par affinité.
Les résines et les kits utilisent des billes d’agarose activée et une chimie de couplage robuste pour immobiliser les protéines et autres ligands à travers les amines primaires (-NH2) dans la résine. Une fois qu’un anticorps ou un autre ligand est immobilisé, la résine d’affinité préparée peut être utilisée pour diverses méthodes de purification impliquant la chromatographie par lots ou sur colonne. La résine et la liaison sont stables dans les conditions de liaison et d’élution généralement utilisées dans la chromatographie par affinité, ce qui permet d’utiliser la résine préparée sur 10 cycles de purification par affinité minimum.La réaction de couplage AminoLink Plus implique la formation spontanée de liaisons de base Schiff entre les aldéhydes (sur le support) et les amines (sur le ligand) et leur stabilisation subséquente par incubation avec un réducteur doux (cyanoborohydrure de sodium). Toute la réaction de couplage, appelée amination réductrice, se produit entre 4 à 6 heures dans des tampons simples non amines tels que le PBS. L’efficacité du couplage avec les anticorps et les protéines types est généralement supérieure à 85 %, produisant entre 1 et 20 mg de protéines immobilisées par millilitre de billes d’agarose.
Points clés :
Résine de couplage AminoLink Plus –agarose en microbilles réticulée à 4 % activée à l’aldéhyde.
Idéal pour les anticorps et autres protéines – immobilise les molécules via les amines primaires (-NH2)
Conditions de couplage flexibles – couplage efficace (>>85 %) sur une vaste plage de pH (4 à 10) et de conditions de tampon (PBS ou autre tampon non aminé avec ou sans solvant organique) ; protocoles de couplage normal (PBS, pH 7.2) et optimisé (borate, pH 10) fournis
Immobilisation stable et permanente – la réaction de couplage entraîne une liaison d’amine secondaire stable et anti-fuite entre la résine et le ligand
Mieux que l’immobilisation à l’agarose activée par CNBr – la liaison est plus stable et non chargée, ce qui entraîne moins de liaisons non spécifiques dans les procédures de purification par affinité
Polyvalente et réutilisable – la résine d’affinité préparée est adaptable aux techniques d’affinité de colonnes et de lots et la résine est réutilisable pour les applications typiques basées sur les interactions de liaison protéique
Kits et tailles de produits pratiques – choisissez des kits à 1 ou 5 colonnes contenant des ensembles complets de tampons, réactifs et colonnes de centrifugation polyvalentes, ou sélectionnez de la résine en vrac ; quantités en vrac disponibles pour les applications de fabrication
Comprend :
Les kits contiennent des colonnes AminoLink Plus, des tampons de couplage neutre et optimisés (réf. 44894 uniquement), un tampon d’absorption, une solution de lavage, une solution de cyanoborohydrure de sodium et des accessoires de colonne
