Détectez facilement l’internalisation des anticorps, la phagocytose et l’endocytose grâce aux kits de marquage de cellules de bactéries et de mammifères pHrodo Deep Red et de protéines à micro-échelle pHrodo iFL Red et Green. Les colorants pHrodo iFL Red, pHrodo iFL Green et pHrodo Deep Red sont non fluorescents dans des environnements neutres, mais fortement fluorescents dans des conditions acides. Ceci permet la discrimination des protéines et des anticorps liés aux colorants dans les structures cellulaires telles que les phagosomes et les endosomes, ou les cellules phagocytées par rapport aux cellules non phagocytées.
Le kit de marquage de protéines à micro-échelle pHrodo iFL Red et pHrodo iFL Green fournissent les réactifs nécessaires pour marquer facilement trois échantillons d’anticorps ou de protéines purifiés à petite échelle (20 à 100 µg) avec du colorant pHrodo iFL Red ou pHrodo iFL Green. Ces kits contiennent du colorant d’ester STP pHrodo iFL Red or Green sensible au pH et réactif à l’amine qui se lie de façon covalente à des lysines libres partout où elles se trouvent dans un anticorps ou une protéine.
Les colorants pHrodo iFL Red et pHrodo iFL Green sont des versions améliorées des colorants pHrodo Red et pHrodo Green et optimisés pour la création de bioconjugués solubles et vifs à utiliser dans l’étude de l’internalisation des anticorps, de l’endocytose et de la phagocytose. Ils sont également plus solubles que les colorants pHrodo Red et pHrodo Green d’origine, ce qui les rend utiles pour le marquage des anticorps qui peuvent autrement se précipiter en dehors de la solution pendant la conjugaison. Les colorants pHrodo iFL Red et pHrodo iFL Green ne sont pas fluorescents à l’extérieur de la cellule, mais sont fortement fluorescents en rouge ou vert lorsque le pH de leur environnement devient plus acide, tel que dans les phagosomes et les endosomes.
Les kits de marquage à micro-échelle pHrodo iFL Red et Green offrent les avantages suivants :
Points forts
Praticité
—le marquage prend généralement deux heures, avec moins de 30 minutes de temps de manipulation
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Polyvalence
—le marquage peut être effectué sur des protéines de poids moléculaire compris entre 12 et 150 kDa
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Personnalisation
—créez vos propres sondes pour l’étude de l’internalisation des anticorps, la phagocytose et l’endocytose
Le kit de marquage de cellules de bactéries et de mammifères pHrodo Deep Red fournit les réactifs nécessaires pour marquer facilement les cellules vivantes (de mammifères ou de bactéries) pour l’étude de la phagocytose et de l’endocytose. Il est optimisé pour la discrimination des cellules phagocytosées et non phagocytosées, car le colorant pHrodo Deep Red sensible au pH et à faible fond ne présente aucun signal dans des conditions neutres et est fluorescent que lorsqu’il est exposé à des environnements acides. Cette propriété unique du pHrodo Deep Red permet le développement rapide des dosages et la fiabilité des résultats lors de l’étude des voies endocytiques et phagocytiques. Le colorant pHrodo Deep Red offre une meilleure discrimination du chargement internalisé de l’extérieur de la cellule, car il a un pKa approximatif de 5 et n’est pas fluorescent tant qu’il n’a pas pénétré dans le dernier endosome et lysosome. Le colorant pHrodo Deep Red peut être détecté à l’aide d’un ensemble de filtres fluorescents Cy5 et a été validé pour une utilisation dans diverses applications, notamment la cytométrie en flux, la microscopie par fluorescence et l’analyse à haute densité (HCA).
Multiplexage
—Le colorant pHrodo Deep Red peut être multiplexé avec une grande variété de rapporteurs et de colorants bleus, verts et rouges tels que GFP et RFP, Mitosox Green ou Red, CellEvent Caspase 3/7 Green ou Red, NucBlue, ou TMR, entre autres
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Simplicité
—protocole étape par étape facile à suivre
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Fenêtre de signalisation supérieure
—le fond minimal à un pH neutre permet un rapport signal/bruit maximal pour une fiabilité des résultats
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Faible pKa
—élimine le signal non-spécifique du chargement non internalisé et n’est fluorescent que dans les derniers endosomes et lysosomes
Caractéristiques techniques
| Marque | Invitrogen |
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| Réf. B-LABO | BL-RE-160967 |
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| Réf. fabricant | 17142534 |
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| À utiliser avec (application) | Analyse cellulaire |
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| Type de produit | Kit de marquage cellulaire |
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| Quantité | 1 kit |
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| Contenu et stockage | Conserver à –20°C, desséché et à l’abri de la lumière.<br><br> |
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| À utiliser avec (équipement) | Cytomètre en flux |
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| Gamme de produits | pHrodo™ |
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Documentation
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