La transcriptase inverse (RT) SuperScript III est active à 50°C et a une demi-vie de 220 minutes, procurant une plus grande spécificité avec les amorces spécifiques aux gènes (GSP) et le rendement d’ADNc le plus élevé de toutes les RT. Elle est idéale pour la RT-PCR d’un gène spécifique ou pour générer de l’ADNc à partir d’échantillons d’ARN total ou d’ARN poly (A)+. Tout comme SuperScript II, elle synthétise un brin d’ADN complémentaire à partir d’ARN premier brin, d’ADN ou à partir d’un hybride ARN / ADN. La RT SuperScript III est génétiquement conçue par l’introduction de mutations de points qui augmentent la demi-vie, réduisent l’activité de l’ARNase et augmentent la stabilité thermique.
- Thermostabilité : demi-vie de 220 minutes à 50°°C
- Rendement : activité de la RNase H réduite pour plus d’ADNc pleine longueur
- Spécificité : pleine activité à 50°C pour une spécificité accrue avec des amorces spécifiques aux gènes
- Applications : marquage de matrice, bibliothèques d’ADNc, RT-PCR, extension des amorces, RACE de 3’ et 5’
- Source : Purifié à partir de l’E. coli exprimant le gène pol de M-MLV, mutagéné pour augmenter la stabilité thermique et la demi-vie et réduire l’activité de la RNase H.
- Tests de performance et de qualité : Pureté SDS-PAGE ; dosages d’endodésoxyribonucléase, d’exodésoxyribonucléase et de ribonucléase ; rendement et longueur du produit d’ADNc
- Concentration : 200 U / μl
- Définition de l’unité : Une unité de RT SuperScript III représente la quantité d’enzymes nécessaire pour incorporer 1 nmol de désoxyribonucléotide dans une substance précipitable à l’acide, en 10 minutes, à 37°C en utilisant la poly(A)·oligo(dT)12 à 18 comme amorce·modèle.
- Conditions de réaction de l’unité : 50 mM de Tris-HCl (pH 8,3), 40 mM de KCl, 6 mM de MgCl2, 1 mM de DTT, 0,5 mM de [3H]dTTP, 0,1 mM de poly(A), 0,1 mM d’oligo(dT)12-18, 0,1 mg / ml de BSA et enzyme dans 50 μl pour 10 min à 37°C.
- Température de réaction optimale : 50°C
- Taille du produit final : 12,3 kb ou moins
PCR et PCR en temps réel, transcription inverse, marquage de matrice, bibliothèques d’ADNc, extension d’amorce, RACE de 3’ et 5’
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Conditions d’expédition : Glace carbonique
