Invitrogen™ Système de synthèse premier brin Super… | B-LABO France
Invitrogen™ Système de synthèse premier brin SuperScript™ pour la RT-PCR
Réf. : BL-EQ-070895Réf. fabricant : 10684803
770,00 € HT
Optimisé pour la synthèse d’ADNc premier brin à partir de poly(A)+ purifié ou d’ARN total.
Contenu et stockage
• Oligo(dT)12-18, 50 μl (0,5 μg/μl) • Hexamères aléatoires, 250 μl (50 ng/μl) • Tampon RT 10X, 1 ml • Chlorure de magnesium, 500 μl (25 mM) • DTT, 250 μl (0,1 M) • Mélange dNTP, 250 μl (10 mM) • RT SuperScript™ II, 50 μl (50 U/μl) • RNaseOUT™, 100 μl (40 U/μl) • RNase H d’E. coli, 50 μl (2 U/μl) • Eau traitée au DEPC, 1,2 ml • ARN de contrôle, 15 μl (50 ng/μl) • Amorce de contrôle A, 20 μl (10 μM) • Amorce de contrôle B, 20 μl (10 μM)
Conserver à –20°C.
Format
Kit
GC-Rich PCR Performance
Élevé
Vitesse de réaction
50 min
Technique
Transcription inverse
Marque
Invitrogen
Le système de synthèse SuperScript premier brin pour RT-PCR peut être utilisé avec seulement 1 ng et jusqu’à 5 μg d’ARN total. Après la synthèse, l’ADNc peut être amplifié avec des amorces spécifiques par la PCR sans extraction organique intermédiaire ni précipitation à l’éthanol. En conjonction avec la PCR, le système peut être utilisé pour détecter la présence de messages rares, pour définir la quantité d’ARNm spécifique à partir d’un petit nombre de cellules, ou pour cloner des ADNc spécifiques sans construire une bibliothèque d’ADNc complète. Le système est souple et permet d’utiliser tous les enzymes de PCR. Associez-le à l’ADN-polymérase AccuPrime™ Taq ou l’ADN polymérase Platinum Taq pour une PCR plus spécifique ou à l’ADN polymérase AccuPrime Pfx pour les applications de clonage haute-fidélité.
Utilisation du système de synthèse SuperScript premier brin pour RT-PCR Ce système a été optimisé pour synthétiser l’ADNc premier brin à partir de quantités variables de matériaux de départ. La concentration de SuperScript II RT a été diminuée et l’inhibiteur de RNase recombinante RNaseOUT a été ajouté au système dans le cadre de ce processus d’optimisation. En outre, les conditions de réaction ont été modifiées pour augmenter encore plus la sensibilité du système. À l’aide du kit, vous synthétisez l’ADNc premier brin avec de l’ADN total ou de l’ARN sélectionné par poly(A)+ amorcé avec de l’oligo(dT), des amorces aléatoires ou une amorce propre au gène. La PCR est effectuée dans un tube distinct à l’aide d’amorces propres au gène d’intérêt.
PCR & PCR en temps réel, transcription inverse
Points forts
Informations sur la commande
Conditions d’expédition : Glace humide
Caractéristiques principales
RT SuperScript II La réaction de synthèse d’ADNc premier brin est catalysée par transcriptase inverse (RT) SuperScript II. Cette enzyme a été conçue pour réduire l’activité de RNase H qui détériore l’ARNm au cours de la réaction premier brin, ce qui a pour résultat une bien meilleure synthèse d’ADNc sur toute la longueur et des rendements plus élevés d’ADNc premier brin que ce qui est obtenu avec RNase H+ RT
Dans la mesure où la SuperScript II RT n’est pas inhibée sensiblement par l’ARN ribosomique et l’ARN de transfert, elle peut être utilisée efficacement pour synthétiser l’ADNc premier brin à partir d’une préparation d’ARN total.
L’enzyme démontre une stabilité thermique accrue et peut être utilisée à des températures pouvant atteindre 50°C.