Le kit NucleoSpin™ RNA L permet l’isolement de l’ARN de haute qualité exempt d’ADN à partir de grandes quantités de matériaux de départ, tels que des cellules de culture, des tissus, des bactéries et des levures. Les cellules sont lysées par incubation dans une solution contenant de grandes quantités d’ions chaotropiques. Ce tampon de lyse désactive immédiatement les RNases et crée des conditions de liaison appropriées qui favorisent l’adsorption de l’ARN sur la membrane de silice. Après la lyse, une homogénéisation complète et une réduction de la viscosité sont réalisées par filtration avec des unités de filtration L NucleoSpin™. L’ADN contaminant lié à la membrane de silice est éliminé par une solution DNase I qui est directement appliquée à la membrane de silice pendant la préparation. Les conditions optimales pour la DNase sont obtenues en lavant la membrane de silice avec un tampon de dessalage spécifique avant le traitement. Les sels, les métabolites et les composants cellulaires macromoléculaires sont éliminés par des étapes de lavage simples avec deux tampons différents. L'ARN total est finalement élué avec de l'eau exempte de RNase. Composants du kit : Colonnes NucleoSpin™ RNA L avec tubes de prélèvement de 15 ml, tubes d’élution de 15 ml, filtres L NucleoSpin™, tampons, DNase I sans RNase, tampon de réaction DNase I, eau sans RNase.
Caractéristiques principales
DNase I incluse pour l’élimination de l’ADN génomique et filtres NucleoSpin™ inclus pour l’homogénéisation et la réduction de la viscosité du lysat
Échantillon : <5 x 107 cellules de culture, <1010 cellules bactériennes, ≤3 x 108 cellules de levure, <200 mg de tissu
RIN standard : >9
Volume d’élution : 500 μl
Capacité de liaison : 700 μg
Temps de préparation : 80 min/4 préparations
Format : colonne de centrifugation Midi, isolement d’ARN total à partir de cellules de culture, tissus, bactéries, levures, échantillons stockés dans RNAlater et nettoyage ARN de mélanges de réaction.
Caractéristiques techniques
Marque
Macherey-Nagel
Réf. B-LABO
BL-RE-090006
Réf. fabricant
10551443
Contenu bactérien
< 10<sup>10</sup> cellules
Format
Colonnes de centrifugation Midi
À utiliser avec (application)
Isolement d’ARN des tissus et des cellules en culture
