Pour l'isolement de l'ARNm poly(A) à partir de l'ARN total
L'ARNm NucleoTrap™ assure une récupération et une qualité élevées de l'ARNm poly(A) qui n'est pas dégradé et qui est exempt de contamination par l'ADN.
Le processus de purification est basé sur la chromatographie d'affinité à l’aide de microbilles en latex et est modifié de façon covalente avec des résidus oligo(dT). Dans des conditions très salines, l'ARNm poly(A) sera lié aux particules. La pastille de billes de latex-ARNm est remise en suspension dans un tampon de lavage et transférée sur le filtre NucleoSpin™, ce qui permet de recueillir facilement les billes de latex. Après deux étapes de lavage supplémentaires, l'ARNm poly(A) est élué avec de l'eau exempte de nucléase ou un tampon à faible teneur en sel : Les hybrides A-dT sont déstabilisés dans des conditions de force ionique réduite. Les kits d'ARNm NucleoTrap™ contiennent des filtres de centrifugation ainsi que tous les réactifs et tampons nécessaires à l'isolement de l'ARNm poly(A) hautement pur issu des préparations d'ARN total. Pour les analyses ultérieures, l'enrichissement de l'ARNm est surtout recommandé pour la construction de bibliothèques d'ADNc ou pour des procédures de transfert complexes afin de réduire les signaux de fond. L'ARNm poly(A) purifié est prêt à être utilisé pour toutes les applications en aval, comme par exemple la construction de bibliothèques d'ADNc, les techniques de transfert, la RT-PCR*, la traduction
in vitro
, la matrice d'expression et l'affichage différentiel
: Kit mini ARNm NucleoTrap™ - microfiltres NucleoSpin™, microtubes à centrifuger, 24 de microbilles en latex oligo(dT), tampons, eau exempte de RNase. Kit midi d'ARNm NucleoTrap™ - Microfiltres NucleoSpin™, microtubes à centrifuger, 90 mg de microbilles en latex oligo(dT), tampons, eau exempte de RNase.
Convient à l'isolement de l'ARNm poly(A) à partir de l'ARN total ; décontamination des transcrits in vitro ; protocole de soutien pour la purification directe de l'ARNm poly(A) à partir des cellules.
| Marque | Macherey-Nagel |
|---|---|
| Réf. B-LABO | BL-RE-090129 |
| Réf. fabricant | 12708512 |
| À utiliser avec (application) | Pour l'isolement de l'ARNm poly(A) à partir de l'ARN total |
| Nbre de réactions | 12 |
| Type de produit | NucleoTrap™ mRNA |
| Quantité | 1 Each |
| Heure du test | 30min. |
| Rendement | 40μg |
