Vecteurs de transfert qui permettent une expression de haut niveau dans les cellules d’insectes en introduisant le gène d’intérêt dans le locus du gène de la polyèdrine de l’ADN de l’AcMNPV par recombinaison homologue.
Vecteurs d’expression du baculovirus pLSG-IBA (cellules d’insectes)
Le vecteur pLSG-IBAwt1 porte le promoteur de la polyédrine pour une expression de haut niveau dans les cellules d’insectes.
Veuillez noter que le clonage dans les vecteurs accepteurs pLSG-IBA nécessite obligatoirement l’enzyme de restriction Esp3I car aucun autre MCS n’est disponible pour l’intégration d’un gène d’intérêt. En plus du clonage direct du gène d’intérêt dans les vecteurs pLSG-IBA avec Esp3I, une autre option via un vecteur d’entrée est possible.
La cotransfection avec de l’ADN AcMNPV linéarisé BacPAK6 (Clontech) ou un ADN AcMNPV modifié flashBAC circulaire (Oxford Expression Technologies) permet la génération de baculovirus recombinant à très haute efficacité grâce à la reconstitution d’un gène essentiel (ORF 1629) et à l’élimination du virus de type sauvage dans une large mesure.
Clonage et expression de protéines recombinantes dans des cellules d’insectes
Le promoteur de la polyédrine entraîne l’expression de haut niveau de l’insert
La résistance à l’ampicilline et l’origine de la réplication (pUC) de ColE1 favorisent la propagation dans E. coli
Vecteur accepteur pour l’expression de bacula (cellule d’insecte)
Tampon de stockage
Tampon TE de 20 µl : 10 mm de Tris-HCl, 1 mm d’EDTA / 5 µg
Contenu et stockage
2°C à 8°C pour une utilisation fréquente, -20°C pour un stockage à long terme
Marqueur de protéine
Marqueur Twin-Strep-tag™ pour extrémité N-terminale et marqueur His Tag (6x) pour extrémité C-terminale
Concentration
250 ng/μl
Quantité
5 µg
Couleur
Transparents
À utiliser avec (application)
Clonage de gènes d’intérêt pour une utilisation dans l’expression fonctionnelle, la purification, la détection, l’immobilisation ou la séparation des protéines recombinantes
