Permet une stratégie de clonage très efficace en une seule étape et en 5 minutes (“Clonage TOPO”) pour l’insertion directe de produits PCR amplifiés par polymérase Taq dans un vecteur plasmidique à des fins de sous-clonage.
Les kits de clonage sont disponibles dans une vaste gamme de cellules compétentes, ou sans cellules compétentes, selon vos besoins et votre budget. Chaque kit utilise le vecteur TA pCR 2.1-TOPO avec des sites de restriction pratiques pour le sous-clonage.
Vecteur TA pCR 2.1-TOPO : simplicité du clonage et du sous-clonage
Le vecteur TA pCR 2.1-TOPO est linéarisé avec des saillies de 3’-thymidine (T) pour la ligature directe des produits PCR amplifiés par polymérase Taq (TA cloning) et est “activé” avec la topoisomérase I liée par covalence. Il n’est pas nécessaire d’ajouter de ligase et le clonage est terminé en cinq minutes. Les sites EcoRI flanquant le site d’insertion du produit PCR permettent une excision facile des inserts ou utilisent n’importe quelle combinaison de 15 sites de restriction pratiques flanquant votre insert PCR pour un sous-clonage directionnel facile.
Sélection et manipulation des clones TA pCR 2.1-TOPO
Le vecteur TA pCR ; 2.1-TOPO contient à la fois des marqueurs de résistance à l’ampicilline et à la kanamycine et le gène LacZα pour la sélection bleu/blanc.
Clonage simplifié basé sur TOPO
Grâce à la technologie de clonage TOPO, il n’est pas nécessaire d’utiliser des amorces pour PCR contenant des séquences spécifiques ou des procédures post-PCR, de préparer les vecteurs ni d’effectuer d’autres étapes de manipulation longues d’ADN. Il suffit d’ajouter votre réaction PCR directement dans le vecteur chargé en topoisomérase, d’incuber pendant 5 minutes et de la transformer les cellules compétentes E. coli.
Clonage efficace
Avec jusqu’à 95 % de clones porteurs de l’insert désiré, vous n’avez plus besoin d’analyser autant de clones, ce qui vous permet de gagner du temps et de l’argent. Le vecteur TA PCR 2.1 polymérase-TOPO utilisé dans ce kit est livré avec des saillies de 3’- T pour une ligature efficace des produits PCR amplifiés par polymérase Taq, qui contiennent des saillies de 3’A.
La norme du clonage
En matière de clonage, la technologie de clonage TOPO est un partenaire fiable pour des milliers de scientifiques depuis plus de dix ans. Rapide, simple à utiliser et efficace, le clonage TOPO a été appliqué à de nombreux vecteurs différents pour un large éventail d’applications.
Kits de sous-clonage TOPO TA Cloning : options de kit
Le kit de séquençage TOPO TA Cloning peut être acheté avec une une variété de cellules compétentes offrant différents avantages selon vos besoins :
Clonage, clonage par PCR
