Kit ELISA sandwich
Kit is designed to detect and quantify the level of STAT3 (Phospho) [pY705] in fresh or frozen human cell lysates. Cross-reactivity has been observed in mouse and rat cells. The assay recognizes both natural and recomb. human STAT3 (Phospho) [pY705]. Principle of the method A monoclonal capture antibody specific for STAT3 (Phospho) [pY705]) has been coated onto the wells of 96-well plate. During the first incubation, standards of known content and unknown samples are pipetted into the wells and the antigen binds to the immobilized (capture) antibody. After washing, a rabbit antibody specific for the target protein is added to the wells and serves as a detection antibody by binding to the immobilized protein captured during the first incubation. After washing, a HRP labeled anti-rabbit IgG is added. This binds to the detection antibody to complete the four member sandwich. After a third incubation and washing to remove all the unbound enzyme, a substrate solution (TMB) is added, which is acted upon by the bound enzyme to produce color. The intensity of this colored product is directly proportional to the concentration of target protein present in the original specimen and the optical density can be read on a standard microplate reader. Rigorous validation Each manufactured lot of this ELISA kit is quality tested for criteria such as sensitivity, specificity, precision, and lot-to-lot consistency. See manual for more information on validation.
STAT3 appartient à la famille des protéines STAT (signal transducers and activators of transcription - transmetteurs du signal et activateurs transcriptionnels) qui sont phosphorylées par les kinases associées aux récepteurs, transloqués au noyau et agissant comme facteurs de transcription en réponse aux cytokines et aux facteurs de croissance. Des coactivateurs tels que les liaisons protéiques CREB sont nécessaires pour l’activation transcriptionnelle par STAT3. STAT3 peut également être activé par interféron alpha, interféron gamma, EGF, PDGF et IL6. La phosphorylation sur la tyrosine 705 par JAK1 et JAK2 est essentielle pour la formation de dimères STAT3, la translocation nucléaire et l’activité de liaison de l’ADN. Chez l’homme, le gène STAT3 se trouve sur le bras q du chromosome 17. STAT3 a été activé par IFN alpha, mais pas par IFN bêta. Les facteurs de transcription associés à STAT3 sont c-Jun et la liaison protéique de l’activateur cyclique sensible à l’AMP (CREB). STAT3 modère l’expression d’une variété de gènes en réponse aux stimuli cellulaires et joue ainsi un rôle clé dans de nombreux processus cellulaires tels que la croissance cellulaire et l’apoptose. Il a été démontré que la petite GTPase Rac1 se lie et régule l’activité de STAT3 alors que la protéine PIAS3 est un inhibiteur spécifique de STAT3. Trois variantes de transcription épissées codant des isoformes distinctes de STAT3 ont été parallèlement décrites. La suppression du gène STAT3 chez les souris knock-out a été mortelle au début du stade embryonnaire.
Conditions d’expédition : Glace humide
| Marque | Invitrogen |
|---|---|
| Réf. B-LABO | BL-RE-106068 |
| Réf. fabricant | 10502625 |
| Numéro d’adhésion | P40763,P42227,P52631 |
| Plage de dosage | 1,57-100 U/ml |
| Sensibilité du dosage | < 0,9 U/mL |
| Concentration | 1,6 U/ml |
| Conjugué | HRP |
| Type de produit | Kit ELISA |
| Type d’échantillon | Lysats cellulaires |
| Type de substrat | Facteurs de transcription |
| Espèces cibles | Souris, rat |
| À utiliser avec (équipement) | Lecteur de microplaques colorimétriques |
| Identification génétique (Entrez) | 20848, 25125, 6774 |
| Symbole de gène(s) | ADMIO,ADMIO1,APRF,HIES |
| Temps d’incubation | 4 h |
| Coefficient de variation inter-dosage | 4,5% |
| Coefficient de variation intra-dosage | 3,9% |
| Contenus des kits | Plaque à 96 puits pré-enduite, Étalon, Tampon de dilution standard, Détection d'anticorps, Anti-lapin HRP, Diluant HRP, Tampon de lavage, Chromogène, Solution d’arrêt, Couvercles de plaques adhésives |
| Marqueur ou colorant | HRP |
| Marqueur génétique | STAT 3 |
| Quantité | 96 tests |
| État réglementaire | RUO |
| Volume d’échantillon | Lysat cellulaire (,10 μl) |
| Conditions de stockage | 2°C à 8°C |
| Cible | Humain, souris et rat |
| Heure du test | 1 h 20 min |
| Durée totale du dosage | 4 h |
