Kit ELISA sandwich
Kit is designed to detect and quantify the level of STAT5 alpha (Total) in fresh or frozen human cell lysates. Cross-reactivity has been observed in mouse and rat cells. The assay recognizes both natural and recomb. human STAT5 alpha (Total), independent of its phosphorylation state. Principle of the method A monoclonal capture antibody specific for human STAT5 alpha (Total) has been coated onto wells of 96-well plate. During the first incubation, standards of known content and unknown samples are pipetted into the wells and the antigen binds to the immobilized (capture) antibody. After washing, a rabbit antibody specific for the target protein is added to the wells and serves as a detection antibody by binding to the immobilized protein captured during the first incubation. After washing, a HRP labeled anti-rabbit IgG is added. This binds to the detection antibody to complete the four member sandwich. After a third incubation and washing to remove all the unbound enzyme, a substrate solution (TMB) is added, which is acted upon by the bound enzyme to produce color. The intensity of this colored product is directly proportional to the concentration of target protein present in the original specimen and the O.D. can be read on a standard microplate reader. Rigorous validation Each manufactured lot of this ELISA kit is quality tested for criteria such as sensitivity, specificity, precision, and lot-to-lot consistency. See manual for more information on validation.
STAT5 alpha est membre de la famille STAT des facteurs de transcription. En réponse aux cytokines et aux facteurs de croissance, les membres de la famille STAT sont phosphorylés par les kinases associées aux récepteurs, puis forment des homo- ou des hétérodimères qui se transloquent au noyau cellulaire où ils agissent comme activateurs de transcription. STAT5 alpha est activé par les réponses, et favorise celles de nombreux ligands cellulaires, tels que IL2, IL3, IL7 GM-CSF, érythropoïétine, thrombopoïétine, et différentes hormones de croissance. L’activation de STAT5 alpha dans le myélome et le lymphome associés à la fusion du gène TEL/JAK2 est indépendante du stimulus cellulaire et a été démontrée comme essentielle pour la tumorigenèse. Il a été démontré que la contrepartie de la souris de STAT5 alpha induit l’expression de BCL2L1/BCL-X(L), ce qui suggère la fonction antiapoptotique de cette protéine dans les cellules. STAT5 alpha, ainsi que STAT5 bêta, ont été identifiés chez la souris. Les séquences d’acides aminés de STAT5 alpha et STAT5 bêta montrent une similarité de séquence de 96 %, et les deux protéines sont co-exprimées dans la plupart des tissus des souris vierges et des souris en lactation. Cependant, l’accumulation différentielle de l’ARNm de STAT5 alpha et STAT5 bêta a été rapportée pour les tissus musculaires et mammaires. STAT5 alpha est impliqué de manière critique dans diverses fonctions physiologiques, notamment la reproduction, la lactation, la fonction immunitaire et la croissance somatique.
Conditions d’expédition : Glace humide
| Marque | Invitrogen |
|---|---|
| Réf. B-LABO | BL-RE-106685 |
| Réf. fabricant | 10637035 |
| Numéro d’adhésion | P42229, P42230, Q62771 |
| Plage de dosage | 1,56-100 ng/ml |
| Sensibilité du dosage | <1 ng |
| Concentration | 1,56 à 100 ng/ml |
| Conjugué | HRP |
| Type de produit | Kit ELISA |
| Type d’échantillon | Lysats cellulaires |
| Type de substrat | Facteurs de transcription |
| Espèces cibles | Humain, souris, rat |
| À utiliser avec (équipement) | Lecteur de microplaques colorimétriques |
| Identification génétique (Entrez) | 20850, 24918, 6776 |
| Symbole de gène(s) | MGF,STAT5 |
| Temps d’incubation | 4 h |
| Coefficient de variation inter-dosage | 7,3% |
| Coefficient de variation intra-dosage | 4,5% |
| Contenus des kits | Plaque à 96 puits pré-enduite, Étalon, Tampon de dilution standard, Détection d'anticorps, Anti-lapin HRP, Diluant HRP, Tampon de lavage, Chromogène, Solution d’arrêt, Couvercles de plaques adhésives |
| Marqueur ou colorant | HRP |
| Marqueur génétique | STAT5a |
| Quantité | 96 tests |
| État réglementaire | RUO |
| Volume d’échantillon | Lysat cellulaire (,10 μl) |
| Conditions de stockage | 2°C à 8°C |
| Cible | Humain, souris et rat |
| Heure du test | 1 h 20 min |
| Durée totale du dosage | 4 h |
