Kit ELISA sandwich
Le kit ELISA humain de perforine quantifie la perforine Hu dans le sérum, le plasma ou le milieu de culture cellulaire humain. Le dosage reconnaîtra exclusivement la perforine humaine naturelle et recombinante.
L’ELISA sandwich en phase solide à la perforine humaine (essai immuno-enzymatique) est conçu pour mesurer la quantité de la liaison de la cible entre une paire d’anticorps appariés. Un anticorps spécifique à la cible a été prérevêtu dans les puits de la microplaque fournie. Les échantillons, étalons ou témoins sont ensuite ajoutés à ces puits et se lient à l’anticorps immobilisé (capture). Le sandwich est formé par l’ajout du second anticorps (détecteur), se liant à la cible sur un épitope différent de l’anticorps de capture. Une enzyme conjuguée a été incorporée dans le dosage. Après les étapes d’incubation et de lavage pour éliminer la microplaque des substances non liées, une solution de substrat réagit avec le complexe enzyme-anticorps-cible pour produire un signal mesurable. L’intensité de ce produit coloré est directement proportionnelle à la concentration de TP (p) présente dans l’échantillon d’origine.
Chaque lot fabriqué de ce kit ELISA est testé en fonction de sa qualité pour des critères tels que la sensibilité, la spécificité, la précision et la cohérence de lot à lot. Consultez le manuel du produit pour plus d’informations concernant la validation.
La perforine est l’une des protéines cytolytiques majeures des granules cytolytiques. La perforine est un médiateur cytolytique qui est stocké et libéré par des granules cytoplasmiques. De plus, la perforine est impliquée dans la défense immunitaire contre les tumeurs et les infections virales provoquées par les lymphocytes cytotoxiques. La perforine est une protéine de 555 acides aminés avec un peptide signal de 21 acides aminés et a un poids moléculaire de 70 à 75 kD. La perforine est une protéine formant des pores avec un mécanisme de formation de canaux transmembranaires similaire à la C9 et l’homologie entre la perforine et la C9 a été démontrée. Les études montrent que la perforine n’est exprimée que dans les lignées de cellules tueuses et non dans les lymphocytes T auxiliaires ou dans d’autres cellules tumorales testées. On sait que la perforine est une molécule effectrice clé pour la cytolyse médiée par les cellules T et les cellules tueuses naturelles. Les défauts dans le gène perforine provoquent une lymphohistiocytose hémophagocytaire familiale de type 2 (HPLH2), un trouble autosomique récessif rare et létal de la petite enfance. L’épissage alternatif se solde par plusieurs variantes de transcription de la perforine.
| Marque | Invitrogen |
|---|---|
| Réf. B-LABO | BL-RE-107206 |
| Réf. fabricant | 16342014 |
| Numéro d’adhésion | P14222 |
| Plage de dosage | 28,1–1800 pg/ml |
| Sensibilité du dosage | 11,8 pg/ml |
| Conjugué | Biotine |
| Type de produit | Kit ELISA |
| Type d’échantillon | Lysats cellulaires, Sérum, Sérum |
| Espèces cibles | Humaine |
| À utiliser avec (équipement) | Lecteur de microplaques colorimétriques |
| Identification génétique (Entrez) | 5551 |
| Symbole de gène(s) | PRF1 |
| Coefficient de variation inter-dosage | 9,3% |
| Coefficient de variation intra-dosage | 4,9% |
| Contenus des kits | Plaque à 96 puits pré-enduite, Standard (2 flacons), Diluant d’échantillon, Concentrat de tampon de dosage, Anticorps de détection biotinylé, Streptavidine HRP, Tampon de lavage, Solution de substrat, Solution d’arrêt, Couvercles de plaques adhésives |
| Marqueur ou colorant | HRP |
| Quantité | 96 x 10 tests |
| État réglementaire | RUO |
| Volume d’échantillon | Sérum, 20 μl ; plasma, 20 μl ; lysat cellulaire, 20 μl |
| Conditions de stockage | 2°C à 8°C |
| Cible | Humaine |
| Heure du test | 1 h 20 min |
| Durée totale du dosage | 3 h 30 min |
