Kit ELISA instantané
Le test ELISA d’isotypage d’immunoglobuline de souris détecte quantitativement les isotypes d’Ig de souris dans les surnageants de culture cellulaire d’hybridomes de souris. Principe de la méthode Les anticorps de capture spécifiques à une chaîne légère ou à un isotype monoclonal biotinylé anti-souris se lient à la plaque revêtue de Streptavidine. L’isotype d’IG présent dans le contrôle positif ou l’échantillon se lie aux anticorps de capture spécifiques et est simultanément lié par l’anticorps de détection conjugué à la HRP. Après l’incubation, les réactifs non liés et les composants de l’échantillon sont éliminés au cours d’une étape de lavage, et la solution de substrat réactive avec HRP est ajoutée aux puits. Un produit coloré se forme proportionnellement à la quantité d’Ig (H+L) de souris soluble présente dans l’échantillon. Validation rigoureuse Chaque lot fabriqué de ce kit ELISA subit un test de qualité. Consultez le manuel du produit pour plus d’informations concernant la validation.
L’isotype d’un anticorps primaire et l’application dans laquelle il est utilisé peuvent entraîner une coloration de fond. Le bruit de fond des anticorps primaires peut être causé par la liaison aux récepteurs Fc sur les cellules cibles ; par des interactions non spécifiques avec les protéines cellulaires, les glucides et les lipides ; ou par autofluorescence cellulaire. Les anticorps de contrôle d’isotype peuvent agir comme des contrôles négatifs pour aider à différencier le signal de fond non spécifique du signal d’anticorps spécifique, car ils n’ont aucune spécificité pertinente pour un antigène cible. Bien que les contrôles d’isotypes soient les plus couramment utilisés dans la cytométrie en flux, ils sont utiles dans d’autres applications telles que l’immunoprécipitation de la chromatine (ChIP), l’immunohistochimie et les déplacements de gel. Les contrôles d’isotypes doivent correspondre aux espèces d’anticorps primaires et à l’isotype afin que le niveau de coloration spécifique par l’anticorps primaire puisse être déterminé avec précision. En cas d’utilisation d’anticorps primaires marqués directement, le contrôle d’isotype fonctionne mieux s’il est conjugué avec le même marquage que l’anticorps de test.
| Marque | Invitrogen |
|---|---|
| Réf. B-LABO | BL-RE-107335 |
| Réf. fabricant | 15560967 |
| Conjugué | Biotine |
| Type de produit | Kit ELISA |
| Type d’échantillon | Surnageant |
| Espèces cibles | Souris |
| À utiliser avec (application) | ELISA |
| À utiliser avec (équipement) | Lecteur de microplaques colorimétriques |
| Contenus des kits | κ et @lambda ; mélange de contrôle isotype (lyophilisé), Couvercles de plaques adhésives, Anticorps de capture spécifiques à la chaîne légère ou à l’isotype monoclonal anti-souris biotinylé (anti-IgG1 spécifique à l’isotype), Spécifique à la chaîne légère : κ ou λ), Wash Buffer Concentrate 20x (phosphate-buffered saline with 1% Tween 20), lyophilisé, Stop Solution (1M Phosphoric acid), Adhesive Plate Covers, Couvercles de plaques adhésives, Anticorps de capture spécifiques à la chaîne légère ou à l’isotype monoclonal anti-souris biotinylé (anti-IgG1 spécifique à l’isotype), Spécifique à la chaîne légère : κ ou λ), Anticorps monoclonal contre l’Ig (H+L) de rat conjugué HRP, lyophilisé, Microplaque à 96 puits pré-enduite de streptavidine, Diluant d’échantillon, Contrôle positif de la souris : IgG1 de la souris, Solution d’arrêt (Acide phosphoreux 1 m) |
| Marqueur ou colorant | HRP |
| Quantité | 2 x 96 tests |
| État réglementaire | RUO |
| Volume d’échantillon | Surnageant (10 μl) |
| Conditions de stockage | -20°C |
| Cible | Souris |
| Heure du test | 30 min |
| Durée totale du dosage | 2 h 15 min |
