InstantOne ELISA
Le test ELISA InstantOne™ est spécialement conçu pour la mesure précise des AKT 1/2/3 (Ser473 ) phosphorylés (humain, souris, hamster, rat), GSK3bêta (Ser9 ) phosphorylés (humain, souris, rat) et p70S6K (Thr389) phosphorylés (humain, souris) dans les lysats cellulaires. Le kit ELISA InstantOne™ permet une analyse rapide des échantillons en une heure environ. Tous les réactifs utilisés dans un sandwich ELISA traditionnel sont ajoutés en solution à une plaque suivie d’une étape de lavage et d’une détection avec le substrat colorimétrique TMB.
L’AKT, qui existe sous forme des isoformes multiples, est l’une des principales kinases activées par le phosphoinositide 3-kinase (PI3K). L’activation du PI3K entraîne la génération de phosphatidylinositol (3,4,5)-triphosphate (PIP3). Ces deuxièmes messagers lipidiques se lient au domaine d’homologie à la pleckstrine de l’AKT pour favoriser sa translocation à la membrane plasmique en vue de son activation par phosphorylation à Thr308 et Ser473 par PDK1 et au complexe mTOR TORC2, respectivement. La phosphorylation sur ces deux sites est nécessaire pour une activation complète de l’activité Ser/Thr kinase de l’AKT. AKT phosphoryle sur 50 substrats connus, y compris GSK3b, p70S6K, AS160, PRAS40, TSC 1, TCS 2, Raf-1, Bad, la famille de facteurs de transcription FOXO et PFK2. En raison de son rôle critique établi dans de nombreux processus biologiques, l’AKT est une cible fréquente du développement de médicaments liés à l’oncologie. La kinase synthase glycogène 3 (GSK3) est une kinase Ser/Thr qui existe sous la forme de deux isoformes, GSK3a et GSK3β. Contrairement aux autres kinases, la phosphorylation à Ser9 et Ser21 pour GSK3alpha et GSK3bêta, respectivement, conduit à l’inactivation de cette enzyme. La GSK3 a été impliquée dans plusieurs maladies, dont le cancer et le diabète, par sa phosphorylation de la glycogène synthase. La GSK3 a également été associée à des maladies neurodégénératives telles que la maladie d’Alzheimer en raison de sa phosphorylation de la protéine neuronale Tau. La kinase p70 S6 (p70S6K) est un membre de la famille kinase S6 ribosomique des kinases Ser/Thr. L’activité de P70 S6K est contrôlée par plusieurs voies de signalisation, notamment les voies MAPK, la phosphoïnositide 3-kinase (PI3K) et mTOR. Cette régulation entraîne la phosphorylation de plusieurs sites de p70 S6K, y compris de Thr389 dans le domaine des liants, ce qui est nécessaire à une activation complète. Le p70 S6K activé phosphoryle plusieurs résidus sur la protéine ribosomique S6, ce qui entraîne une augmentation de la synthèse protéique.
| Marque | Invitrogen |
|---|---|
| Réf. B-LABO | BL-RE-108154 |
| Réf. fabricant | 15500787 |
| Numéro d’adhésion | P23443, P31749, P31751, P49841, Q9Y243 |
| Conjugué | Biotine |
| Type de produit | Kit ELISA |
| Type d’échantillon | Lysats cellulaires |
| Espèces cibles | Humaine |
| À utiliser avec (application) | ELISA |
| À utiliser avec (équipement) | Lecteur de microplaques colorimétriques |
| Identification génétique (Entrez) | 10000, 207, 208, 2932, 6198 |
| Symbole de gène(s) | AKT,CWS6,PKB,PKB-ALPHA,PRKBA,RAC,RAC-ALPHA,PS6K,S6K,S6K-beta-1,S6K1,STK14A,p70 S6KA,p70(S6K)-alpha,p70-S6K,p70-alpha,GSK3B |
| Contenus des kits | Anticorps de capture, Réactif pour anticorps de détection, Plaque d’analyse InstantOne™, Tampon de lyse cellulaire, Solution activatrice, Tampon de lavage (10x), Réactif de substrat (TMB), Solution d’arrêt, Lysat de cellules témoins positives (lyophilisé), Scellage des plaques |
| Marqueur ou colorant | HRP |
| Quantité | 96 Tests |
| État réglementaire | RUO |
| Volume d’échantillon | Lysat cellulaire (,20 μl) |
| Conditions de stockage | 2°C à 8°C |
| Synonyme | AKT, GSK3B, p70 S6K |
| Cible | Humaine |
| Heure du test | 1 h 20 min |
| Durée totale du dosage | 1 h 10 min |
