"/>
Thermo Scientific™ Active Cdc42 Pull-Down and Dete… | B-LABO France
Thermo Scientific™ Active Cdc42 Pull-Down and Detection Kit
Réf. : BL-RE-109335Réf. fabricant : 11831204
1 028,00 € HT
Purifier les GTPases et les taux d’activation des dosages à l’aide de domaines de liaison des protéines (PBD) marquées par le GST, de perles d’agarose (GSH) et d’anticorps anti-GTPase spécifiques.
Contenu et stockage
• Protéine hybride GST-Pak1-RBD, 1 flacon • Anticorps anti-Cdc42, 5 unités, 300 µl • Résine d’agarose glutathion, 3 ml • GDP (100X), 50 µl • GTPγS (100X), 50 µl • Tampon d’échantillon SDS (2X), 1,5 ml • Tampon de lyse / liaison / lavage (1X), 100 ml • Godets de centrifugation, 30 godets • Tubes de prélèvement, 90 tubes
Voir le manuel du produit pour les conditions de stockage des différents composants.
Description
Kit Pierce de co-précipitation et de détection Active Cdc42
Doser
Test d’analyse quantitative des protéines
Conjugué
HRP
Méthode de détection
Transfert Western, chimiluminescent
Marque
Thermo Scientific
Mesurez l’activation de petits GTPases en les isolant par l’intermédiaire de leurs effecteurs en aval spécifiques grâce aux kits de détection et de transfert de GTPase actif Pierce Thermo Scientific™.
Les kits de co-précipitation et de détection GTPase active mesurent l’activation des petites GTPases en les isolant par le biais de leurs effecteurs spécifiques en aval. Des kits spécifiques des GTPases Arf1, Arf6, Cdc42, Rac1, RalA, Rap1, Ras et Rho sont proposés. Le domaine de liaison respectif de l’effecteur en aval de chaque petite GTPase est exprimé sous forme de protéine de fusion GST. Lorsqu’elle est immobilisée sur une résine, cette protéine de fusion sert à co-précipiter la GTPase active (liée au GTP). L’étape de purification par affinité de la technique de co-précipitation s’effectue aisément à l’aide de colonnes à centrifuger pour microcentrifugeuse. Après un simple lavage, la GTPase liée est récupérée par élution de la protéine fusion GST à partir de la résine glutathion, en utilisant un tampon de chargement d’échantillon SDS-PAGE. La GTPase purifiée est alors détectée par Western blot, à l’aide d’un anticorps spécifique fourni dans chaque kit.
Chaque kit GTPase comprend une protéine de fusion GST du domaine de liaison spécifique, ainsi que des activateurs GTPγS et GDP, une résine glutathion-agarose, un tampon de lyse-liaison-lavage, un anticorps primaire, un tampon d’échantillon SDS 2X, des colonnes à centrifuger et des tubes de prélèvement. Chaque kit contient des composants en quantité suffisante pour effectuer 30 dosages de co-précipitation. Les kits sont optimisés pour la détection du transfert Western avec un anticorps secondaire conjugué au HRP (réf. n° 31460, lapin ; réf. n° 31430, souris) à l’aide du substrat chimiluminescent Thermo Scientific SuperSignal™ West Pico (réf. n° 34080).
Points forts
Points clés
Haute sensibilité et haute précision : des réactifs optimisés, les anticorps spécifiques et la procédure de transfert Western garantissent des contrôles précis et des résultats quantitatifs
Praticité : inutile d’exprimer et de purifier vos propres protéines hybrides GST-PBD ou RBD ou d’utiliser des résines d’affinité d’immunoprécipitation à base d’anticorps coûteuses
Rapidité : incubation simultanée du lysat cellulaire avec le GST-PBD ou le RBD et la résine de glutathion directement dans une colonne de centrifugation de microcentrifugeuse haute performance
Simplicité d’utilisation : les réactifs et les conditions d’extraction ont été optimisés pour une réussite immédiate, même pour les nouveaux utilisateurs
Efficacité : les colonnes de centrifugation et les tubes de prélèvement de la microcentrifugeuse permettent une séparation efficace du liquide et de la résine, ce qui évite la perte d’échantillons
Complet : les kits comprennent des réactifs pour la purification par affinité ainsi que des contrôles, un tampon de lyse cellulaire compatible et un anticorps primaire spécifique pour la détection finale par transfert Western
Protéines hybrides GST des domaines actifs de liaison à la GTPase
Le domaine de liaison à Ras de RAF1 (Raf1-RBD) lie les Ras actives
Le domaine de liaison à p21 de Pak1 (Pak1-PBD) lie les Rac1 et Cdc42 actives
Le domaine de liaison à Rho de Rhotekin (Rhotekin-RBD) lie les Rho actives
Le domaine de liaison à Rap1 de RalGDS (RalGDS-RBD) lie les Rap1 actives
Le domaine de liaison aux protéines de GGA3 (GGA3-PBD) lie les protéines Arf1 et Arf6 actives
La protéine de liaison Ral 1 (RalBP1) lie la RalA active
Comprend
Protéine de fusion GST du domaine de liaison spécifique, résine glutathion-agarose, GTPγS et GDP (100X), tampon de lyse-liaison-lavage, anticorps primaire spécifique anti-GTPase, tampon de chargement de l’échantillon SDS-PAGE (2X), colonnes à centrifuger et tubes de prélèvement
Caractéristiques techniques
Marque
Thermo Scientific
Réf. B-LABO
BL-RE-109335
Réf. fabricant
11831204
Contenu et stockage
• Protéine hybride GST-Pak1-RBD, 1 flacon <br>• Anticorps anti-Cdc42, 5 unités, 300 µl <br>• Résine d’agarose glutathion, 3 ml <br>• GDP (100X), 50 µl <br>• GTPγS (100X), 50 µl <br>• Tampon d’échantillon SDS (2X), 1,5 ml <br>• Tampon de lyse / liaison / lavage (1X), 100 ml <br>• Godets de centrifugation, 30 godets <br>• Tubes de prélèvement, 90 tubes <br><br>Voir le manuel du produit pour les conditions de stockage des différents composants.
