Procédez à la digestion des anticorps IgG humains et murins à l’aide de protéase de papaïne immobilisée et purifiez les fragments Fab en utilisant les protéines A et d’agarose.
Description
Kit de préparation de Fab Pierce
Quantité
10 échantillons d’anticorps contenant chacun 0,25 à 4 mg d’IgG
Gamme de produits
Pierce™
Contenu et stockage
Suffisant pour : 10 échantillons d’anticorps, contenant chacun 0,25 à 4 mg d’IgG • Agarose de papaïne Pierce, 1,25 ml • Cystéine-HCl, 1 g • Tampon de digestion Fab, 120 ml • Colonnes de centrifugation de protéine A Plus NAb, 1 ml, 1 colonne • Boîtes de PBS (produisant chacune 500 ml), 2 boîtes • Tampon d’élution d’IgG, 120 ml • Colonnes de centrifugation de dessalage Zeba, à MWCO de 7 K, 2 ml, 10 colonnes • Colonnes de centrifugation, 0,8 ml, 10 colonnes • Microtubes à centrifuger, 2 ml, 30 tubes
Conserver entre 4 et 8°C.
Marque
Thermo Scientific
Les kits de préparation de fragments Fab Thermo Scientific™ Pierce utilisent de la protéase de papaïne immobilisée pour digérer les anticorps IgG humains et murins afin de produire des fragments Fab et Fc distincts et, ensuite, purifier l’anticorps Fab à l’aide de protéines A et d’agarose.
Ces kits utilisent une endopeptidase à thiol de papaïne non spécifique pour cliver enzymatiquement la totalité de l’IgG juste au-dessus de la région charnière pour créer deux fragments Fab séparés et un fragment Fc par molécule d’anticorps. Parce que la protéase de papaïne est fournie sous forme immobilisée de microbilles de résine d’agarose, la réaction de digestion s’arrête facilement en éliminant la résine de la solution d’IgG ; ce qui donne des produits digérés qui sont sans enzymes. La réaction de digestion des anticorps est réalisée dans des colonnes à centrifuger jetables pratiques qui permettent la suppression efficace de la protéase immobilisée et une récupération maximale des fragments d’IgG. Les colonnes à centrifuger à protéine A et les tampons nécessaires à la purification optimale des fragments obtenus sont également fournis dans les kits. La protéine A se lie aux fragments Fc et aux IgG non digérés, et permet ainsi la récupération des fragments Fab purs dans la fraction d’écoulement. Les colonnes de centrifugation de dessalage Thermo Scientific Zeba™ accélèrent et simplifient la préparation des échantillons d’IgG.
Points forts
Points clés
Produits de digestion sans enzymes – la papaïne immobilisée (résine d’agarose en microbilles) contribue au contrôle de la réaction de digestion et à la suppression totale des fragments d’anticorps produits à partir de la protéase
Conviennent aux IgG d’espèces humaines ou d’autres espèces – la procédure du kit est optimisée pour les IgG humaines, de souris et de lapin, mais la digestion basée sur la papaïne est efficace pour de nombreuses espèces et sous-classes d’IgG, y compris celle du le rat, de la chèvre et du porc (Remarque : pour de meilleurs résultats avec l’IgG1 de souris, utiliser la réf. 44980)
Haute capacité – le kit permet la digestion et la purification de près de 4 mg d’IgG à la fois Utilisez le kit de taille standard pour fragmenter 0,25 à 4 mg d’IgG et le kit micro pour 25 à 250 μg d’IgG
Produit des Fab prêts à l’emploi : la digestion et la récupération finale des fragments Fab purifiés s’opère sur un tampon phosphate de sodium au pH neutre, adapté au stockage ou à l’utilisation immédiate dans des applications courantes
Complets et faciles à utiliser – les kits comprennent tous les réactifs, colonnes de centrifugation et accessoires nécessaires à la préparation et à la purification des fragments d’anticorps
Comprend
Résine d’agarose de papaïne, cystéine, tampon de digestion, colonnes à protéine A avec tampon de liaison et d’élution, colonnes de centrifugation de dessalage et accessoires
Caractéristiques techniques
Marque
Thermo Scientific
Réf. B-LABO
BL-RE-126821
Réf. fabricant
10269923
Quantité
10 échantillons d’anticorps contenant chacun 0,25 à 4 mg d’IgG
Gamme de produits
Pierce™
Contenu et stockage
Suffisant pour : 10 échantillons d’anticorps, contenant chacun 0,25 à 4 mg d’IgG<br>• Agarose de papaïne Pierce, 1,25 ml<br>• Cystéine-HCl, 1 g<br>• Tampon de digestion Fab, 120 ml<br>• Colonnes de centrifugation de protéine A Plus NAb, 1 ml, 1 colonne<br>• Boîtes de PBS (produisant chacune 500 ml), 2 boîtes<br>• Tampon d’élution d’IgG, 120 ml<br>• Colonnes de centrifugation de dessalage Zeba, à MWCO de 7 K, 2 ml, 10 colonnes<br>• Colonnes de centrifugation, 0,8 ml, 10 colonnes<br>• Microtubes à centrifuger, 2 ml, 30 tubes<br><br>Conserver entre 4 et 8°C.
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