Les colorants Super Bright sont des fluorophores à base de polymères qui sont excités par le faisceau laser violet (405 nm) et émettent de la fluorescence à la longueur d’onde indiquée dans leur nom. Ils sont optimisés pour une utilisation dans la cytométrie en flux et permettent l’utilisation de canaux supplémentaires avec excitation violette. Les colorants Super Bright sont entièrement compatibles avec d’autres molécules fluorescentes couramment utilisées, les tampons et les fixateurs eBioscience, les colorants de viabilité et les réactifs.Le Super Bright 780 est un colorant en tandem qui peut être excité par le faisceau laser violet (405 nm) et émet à 780 nm. Nous vous recommandons d’utiliser un filtre passe-bande 780 / 60 ou un équivalent. Assurez-vous que votre instrument est capable de détecter ce fluorochrome.Applications testéesLe conjugué de streptavidine Super Bright 780 a été testé par une analyse par cytométrie en flux pour détecter les anticorps primaires biotinylés. La quantité de ce conjugué qui colorera un échantillon cellulaire dans un volume final de 100 μl est inférieure ou égale à 0,125 μg. Le nombre de cellules doit être déterminé de manière empirique mais peut varier de 105 à 108 cellules / test. Il est recommandé d’utiliser de la streptavidine soigneusement titrée pour des performances optimales dans le dosage d’intérêt.Les échantillons peuvent être conservés dans un tampon de fixation IC ou une solution de fixation / lyse en 1 étape pendant trois jours maximum dans l’obscurité à 4°C avec un impact minimal sur la luminosité et l’efficacité / la compensation de FRET. Les performances spécifiques au clone après la fixation doivent être déterminées de manière empirique.Lors de l’utilisation de deux anticorps conjugués au colorant Super Bright, ou plus, dans un panel de coloration, il est recommandé d’utiliser le tampon de coloration complet Super Bright pour minimiser toute interaction de polymère non spécifique. Pour plus d’informations, consultez la fiche technique relative au tampon de coloration complet Super Bright.Dans certaines expériences, nous avons observé que les valeurs de compensation pour les anticorps conjugués Super Bright 780 sont plus élevées dans le canal violet 450 / 50 lors de l’utilisation de microsphères Ultracomp eBeads que dans les cellules colorées avec une seule couleur. Dans de telles circonstances, nous recommandons de régler la compensation avec les cellules. Nous l’avons également observé dans certaines expériences utilisant des billes de compensation totale d’anticorps AbC.Les colorants polymères Super Bright sont vendus sous licence par Becton, Dickinson and Company.
Caractéristiques techniques
| Marque | Invitrogen |
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| Réf. B-LABO | BL-RE-127074 |
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| Réf. fabricant | 16376452 |
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| Concentration | 0,2 mg/ml |
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| Conjugué | Super Bright 780 |
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| Quantité | 100 μg |
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| Contenu et stockage | Conserver au réfrigérateur (2°C à 8°C).<br><br> |
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| Conditions d’expédition | Glace humide |
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| Forme | Liquide |
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| Gamme de produits | eBioscience™ |
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| Type de produit | Conjugué de streptavidine (fluorescent) |
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| Molécule cible | Biotine |
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| Marqueur ou colorant | Super Bright 780 |
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