Clivez et dégradez l’ADN non désiré à simple et double brin
Type de produit
Solution DNase I
Contenu et stockage
Stockage à -20°C
Forme
Liquide
Enzymes
DNase
Quantité
1 000 unités
Marque
Thermo Scientific
La désoxyribonucléase I (DNase I) est un polypeptide glycosylé unique qui dégrade l’ADN simple et double brin indésirable. L’enzyme fonctionne en clivant l’ADN en fragments 5' phosphodinucléotides et en petits fragments oligonucléotidiques. La DNase I est communément ajoutée aux réactifs de lyse cellulaire afin d’éliminer la viscosité provoquée par le contenu en ADN des lysats cellulaires bactériens ou pour éliminer les modèles d’ADN des ARN produits par une transcription in vitro. Deux qualités de DNase sont proposées : l’une qui est suffisante pour le travail sur les protéines et l’autre qui est utile pour toute application nécessitant une digestion de l’ADN, où il est essentiel d’éviter d’endommager l’ARN.
Points forts
Points clés
Dégrade et élimine l'ADN indésirable présent dans les échantillons
Clive l'ADN simple brin et double brin
Compatible avec les réactifs de lyse cellulaire Thermo Scientific Pierce
Réduit la viscosité des lysats bactériens (extraits protéiques) afin de faciliter le pipetage
Fournie sous forme de stocks de glycérol à 50 % dans 10 mM de Tris-HCl de pH 7,5, 10 mM de CaCl2 et 10 mM de MgCl2
Disponible en deux formats pratiques : Testé à la RNase pour protéger l’ARN (N° Réf. 89836) et grade d’extraction protéique pratique (N° Réf. 90083)
Informations générales sur l’utilisation de la DNase I
Les ions calcium sont requis pour l’activité de la DNAse I et des quantités traces de Ca++ peuvent être présentes à des concentrations suffisamment élevées pour que la DNase I soit active ; en revanche, l’utilisation d’EGTA ou de tampons exempts de calcium peut réduire l’activité de la DNase I à des taux indétectables.
Des taux élevés (c’est-à-dire, 100 mM) d’ions monovalents comme Na+ et K+ réduiront l’activité de la DNase I
La DNase I est inactivée par un chauffage à 65°C pendant 10 minutes
Unité Kunitz : 1 unité Kunitz est la quantité d’enzymes requise pour provoquer une augmentation de l’absorbance à 260 nm de 0,001 / min / ml à 25°C dans du NaOAc 0,1 M, pH 5,0, due à la dégradation d’ADN fortement polymérisé
Unités d’analyse de dégradation : 1 unité est définie comme la quantité d’enzymes qui est requise pour totalement dégrader 1 mg d’ADN plasmidique en 10 minutes à 37°C dans du Tris-HCl 10 mM pH 7,5, MgCl2 50 mM, CaCl2 13 mM
Spécifications (réf. 89836)
Aspect visuel : Liquide transparent
Concentration : 1 unité / ml
Activité : ≥ 100 000 unités / mg de protéine
Contamination par la RNase : 20 unités libèrent < 2 % non précipitable à l’éthanol lors d’une incubation avec de l’ARN poly(A) marqué par H3
Analyse fonctionnelle : 1 μl d’enzyme dégrade < 5 % de l’ARN, mais dégrade 100 % de l’ADN
Spécifications (réf. 90083)
Aspect visuel : Liquide transparent et incolore exempt de matières insolubles
Unités : ≥ 2 500 unités / ml
Définition d’une unité : 1 unité est définie comme la quantité d’enzyme requise pour produire une augmentation de l’absorbance à 260 nm de 0,001 / min / ml à 25°C pour de l’ADN fortement polymérisé
Élimination de la viscosité provoquée par l'ADN dans les lysats cellulaires protéiques
Élimination des matrices d'ADN des ARN produits par une transcription in vitro
Caractéristiques techniques
Marque
Thermo Scientific
Réf. B-LABO
BL-RE-127406
Réf. fabricant
15198325
Type de produit
Solution DNase I
Contenu et stockage
Stockage à -20°C
Forme
Liquide
Enzymes
DNase
Quantité
1 000 unités
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