Les sondes de fluorophosphonate (FP) Thermo Scientific™ ActivX permettent le marquage covalent du site actif de la sérine hydrolase avec des marquages d’affinité, fluorescents ou réactifs pour faciliter l’enrichissement sélectif, la détection ou le marquage multiplex.
La sonde TAMRA-FP est dotée d’un groupe réactif de fluorophosphonate qui est utilisé pour marquer et détecter les hydrolases de sérine actives par imagerie de gel fluorescent, électrophorèse capillaire ou spectrométrie de masse. Un anticorps anti-TAMRA est également disponible pour l’immuno-enrichissement des protéines marquées à la sonde TAMRA-FP.Les sondes d’enrichissement de site actif ActivX™ sont avantageuses pour déterminer les teneurs en enzymes actives grâce à l’utilisation de sondes à marquage analogique afin de permettre le profilage des enzymes actives et inactives. Les sondes ActivX enrichissent de manière sélective uniquement les enzymes qui sont fonctionnellement actives et biologiquement pertinentes au moment du marquage. Grâce à l’enrichissement sélectif, on peut identifier et profiler les classes d’enzymes cibles dans les échantillons ou évaluer la spécificité et l’affinité des inhibiteurs enzymatiques. La superfamille de l’hydrolase à sérine est une des familles d’enzymes les plus importantes et les plus diversifiées parmi les protéomes eucaryotes. Les hydrolases à sérine sont généralement regroupées en deux grandes familles : les protéases à sérine (par exemple, la trypsine, l’élastase et la thrombine) et les hydrolases à sérine métaboliques. Les hydrolases à sérine métaboliques sont divisées en plusieurs sous-classes enzymatiques (par exemple, estérases, lipases, amidases et peptidases) en fonction de la structure, du mécanisme catalytique et de la préférence du substrat. Ces sondes peuvent être utilisées pour évaluer l’activité ou pour dépister les inhibiteurs de petites molécules contre les enzymes dérivées des lysats cellulaires, des fractions subcellulaires, des tissus et des protéines recombinantes. Ces produits sont soumis à une licence d’utilisation de marquage limitée.
Caractéristiques techniques
| Marque | Thermo Scientific |
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| Réf. B-LABO | BL-RE-127502 |
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| Réf. fabricant | 11854624 |
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| Formule | TAMRA-fluorophosphonate, poids moléculaire 680 |
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| Contenu et stockage | Conserver à -80°C, à l’abri de la lumière. Les solutions mères en DMSO peuvent être stockées à -20°C pendant 6 mois. |
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| Doser | Test d’analyse quantitative des protéines |
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| Méthode de détection | Chimiluminescence, spectrométrie de masse, transfert Western |
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| Type de substrat | Substrat d’hydrolase à sérine |
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| Gamme de produits | ActivX™ |
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| Quantité | 6,8 µg |
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| À utiliser avec (application) | Extraction |
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| Cible | Hydrolase à sérine |
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| Type | Sonde de fluorophosphonate (FP) |
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| Marqueur ou colorant | Autre(s) étiquette(s) ou colorant(s) |
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| Format | Tube, colonne de centrifugation |
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