Biotinylez sélectivement et purifiez les protéines de surface des cellules de mammifères et excluez les protéines intracellulaires grâce à cet ensemble complet de réactifs.
Type de produit
Kit d’isolement
Contenu et stockage
Dès réception, conserver le kit à 4 °C.Produit expédié à température ambiante.
Forme
Liquide, poudre
Gamme de produits
Pierce™
Tampon
Tampon de lyse
Marque
Thermo Scientific
Le kit d’isolement de protéines de surface cellulaire Thermo Scientific™ est un ensemble complet de réactifs pour la biotinylation sélective et la purification ultérieure des protéines de surface cellulaire de mammifères en excluant les protéines intracellulaires.
Le kit permet de marquer avec une grande efficacité des protéines qui comportent des résidus lysine accessibles et présentent une exposition extracellulaire suffisante. La procédure d'isolement utilise un réactif de biotinylation clivable (Sulfo-NHS-SS-biotine), imperméable aux cellules, qui permet de marquer les amines primaires exposées de protéines présentes sur la surface de cellules adhérentes ou en suspension intactes. Les cellules traitées sont ensuite récoltées et lysées, et les protéines de surface marquées sont purifiées par affinité en utilisant une résine d'agarose Thermo Scientific NeutrAvidin. Les protéines de surface cellulaire isolées contiennent un petit marquage non réactif des amines primaires qui étaient marquées à l’origine mais qui ne sont plus biotinylées (la biotine reste liée à la résine). Le kit contient suffisamment de réactifs pour huit expériences, chacune nécessitant quatre flacons T75 de cellules confluentes.
Points forts
Points clés
Isolement des protéines de surface cellulaire : réduit la complexité des protéines cellulaires totales
Récupération efficace des protéines marquées : la biotine clivable permet de récupérer pratiquement 100 % des protéines de surface cellulaire isolées
Praticité : tous les réactifs sont fournis dans un seul kit, accompagnés d’instructions complètes pour le marquage, la lyse des cellules et la purification des protéines membranaires de surface cellulaire
Applications de transfert Western : les protéines récupérées dans un tampon de SDS-PAGE sont directement chargées sur des gels de polyacrylamide
Système robuste : protocole conçu pour diverses lignées cellulaires, notamment NIH 3T3, HeLa, C6 et A431
Comprend
Réactif de biotinylation, réactif de lyse cellulaire, résine d’agarose d’affinité, divers tampons et colonnes à centrifuger pour microcentrifugeuse
Caractéristiques techniques
Marque
Thermo Scientific
Réf. B-LABO
BL-RE-127544
Réf. fabricant
10230104
Type de produit
Kit d’isolement
Contenu et stockage
Dès réception, conserver le kit à 4 °C.Produit expédié à température ambiante.
Forme
Liquide, poudre
Gamme de produits
Pierce™
Tampon
Tampon de lyse
Type de réactif
Tampon de lyse cellulaire, solution détergente, fractionnement subcellulaire
Suffisant pour
8 réactions
Quantité
1 kit
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