Alexa Fluor™ 488 est un colorant brillant, vert fluorescent, avec un niveau d’excitation parfaitement adapté à la ligne laser de 488 nm. Utilisé pour une génération de signal stable en imagerie et en cytométrie de flux, le colorant Alexa Fluor™ 488 est hydrosoluble et insensible au pH de pH 4 à pH 10. En plus de formulations de colorant réactif, nous offrons le colorant Alexa Fluor™ 488 conjugué à divers anticorps, peptides, protéines, traceurs et substrats d’amplification optimisés pour le marquage et la détection de cellules.
L’ester NHS (ou ester succinimidylique) de l’Alexa Fluor™ 488 est l’outil le plus populaire pour conjuguer ce colorant à une protéine ou à un anticorps. Les esters NHS peuvent être utilisés pour marquer des amines primaires (R-NH
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) de protéines, d’oligonucléotides modifiés par des amines et d’autres molécules contenant des amines. Le conjugué Alexa Fluor™ résultant présentera une fluorescence plus lumineuse et une photostabilité plus élevée que les conjugués d’autres fluorophores similaires sur le plan spectral.
Points forts
Marqueur fluorophore
Colorat Alexa Fluor™ 488
Groupe réactif
Esters NHS :
Réactivité
Amines primaires sur des protéines et des ligands, oligonucléotides modifiés par des amines
Ex/Em du conjugué
494/517 nm
Coefficient d’extinction
73 000 cm-1M-1
Colorants spectralement similaires
FITC, Oregon Green 488
Réaction de conjugaison typique
Vous pouvez conjuguer des réactifs amino-réactifs avec pratiquement n’importe quelle protéine ou peptide (le protocole fourni est optimisé pour des anticorps IgG). Vous pouvez adapter la taille de la réaction à n’importe quelle quantité de protéine, mais la concentration de la protéine doit être d’au moins 2 mg/ml pour des résultats optimaux. Nous recommandons d’essayer trois degrés différents de marquage, en utilisant trois rapports molaires différents du réactif sensible à la protéine.
L’ester NHS Alexa Fluor™ est typiquement dissolu dans du diméthylformamide (DMF) ou du diméthylsulfoxyde (DMSO) anhydre de haute qualité (D12345), et la réaction est effectuée dans un tampon de bicarbonate de sodium de 0,1 à 0,2 M, de pH 8,3 et à température ambiante pendant 1 heure. Parce que le pKa de l’amine terminale est inférieur à celui du groupe amino-epsilon de lysine, vous pouvez atteindre un marquage plus sélectif de l’extrémité de l’amine en utilisant un tampon proche du pH neutre.
Caractéristiques techniques
| Marque | Molecular Probes |
| Réf. B-LABO | BL-RE-129465 |
| Réf. fabricant | 11564007 |
| Quantité | 5 mg |
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| Type de produit | Colorant |
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| Contenu et stockage | Stocker au congélateur (-5 à -30°C) à l’abri de la lumière. |
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| Réactivité chimique | Amine |
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| Conditions d’expédition | Température ambiante |
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| Groupement de réactifs | Ester actif, ester TFP |
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| Marqueur ou colorant | Alexa Fluor™ 488 |
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| Type d’étiquette | Colorants Alexa Fluor |
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| Gamme de produits | Alexa Fluor™ |
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| Émission | 517 nm |
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| Excitation | 494 nm |
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