Mesurer les cystéines peptidiques ou d’autres sulfhydryles libres et réduits (groupes -SH) en solution à l’aide de ce composé coloré réactif au thiol (Amax 412 nm).
Le DTNB Thermo Scientific™ Pierce (réactif d’Ellman) réagit avec les groupes sulfhydryle pour produire un produit coloré, qui fournit une méthode fiable pour mesurer les cystéines réduites libres et d’autres sulfhydryles libres en solution.
Une solution de ce composé produit un produit de couleur jaune mesurable lorsqu’il réagit avec les sulfhydryles. Par conséquent, le réactif d’Ellman est très utile en tant que réactif de dosage sulfhydryle en raison de sa spécificité pour les groupes –SH à pH neutre, à coefficient d’extinction molaire élevé et à temps de réaction court. Les groupes sulfhydryles peuvent être estimés dans un échantillon par comparaison à une courbe standard composée de concentrations connues d’un composé contenant des sulfhydryles comme la cystéine. Par ailleurs, les groupes sulfhydryles peuvent être quantifiés par référence au coefficient d’extinction de TNB.Points clés :
Détection des sulfhydryles : réagit quantitativement avec les groupes sulfhydryle libres (réduits)
Colorimétrique : donne un produit coloré pour permettre la mesure spectrophotémétrique dans des tubes ou des microplaques
Méthode de dosage éprouvée : une chimie bien caractérisée permet la quantification des groupes de peptides ou de protéines sulfhydryle à l’aide du calcul du coefficient d’extinction ou par comparaison avec un étalon de cystéine
