Alexa Fluor™ 647 est un colorant rouge lointain vif et photostable, avec un niveau d’excitation parfaitement adapté à la ligne laser de 633 nm. Utilisé pour une génération de signal stable en imagerie et en cytométrie de flux, le colorant Alexa Fluor™ 647 est hydrosoluble et insensible au pH de pH 4 à pH 10. Invisible pour l’œil humain, la fluorescence de ce colorant Alexa Fluor™ à grande longueur d’onde peut être facilement détectée par la plupart des systèmes d’imagerie. En plus de formulations de colorants réactifs, nous proposons le colorant Alexa Fluor™ 647 conjugué à divers anticorps, peptides, protéines, traceurs et substrats d’amplification optimisés pour le marquage et la détection de cellules (
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).
L’ester NHS (ou ester de succinimidyle) Alexa Fluor™ 647 est l’outil le plus populaire pour conjuguer le colorant à une protéine ou à un anticorps. Les esters NHS peuvent être utilisés pour marquer des amines primaires (R-NH
Points forts
marquage du fluorophore
Colorant Alexa Fluor™ 647
Groupe de réactifs
Ester NHS
Réactivité
Amines primaires sur des protéines et des ligands, oligonucléotides modifiés par des amines
Ex/Em du conjugué
651/672 nm
Coefficient d’extinction
270 000 cm-1M-1
Colorants similaires sur le plan spectral
Cy5™
Réaction de conjugaison classique
Vous pouvez conjuguer des réactifs amino-réactifs avec pratiquement n’importe quelle protéine ou n’importe quel peptide (le protocole fourni est optimisé pour des anticorps IgG). Vous pouvez adapter la taille de la réaction à n’importe quelle quantité de protéine, mais la concentration de la protéine doit être d’au moins 2 mg/ml pour des résultats optimaux. Nous vous recommandons d’essayer trois degrés différents de marquage, à l’aide de trois rapports molaires différents entre le réactif et la protéine.
L’ester NHS Alexa Fluor™ est typiquement dissolu dans du diméthylformamide (DMF) ou du diméthylsulfoxyde (DMSO) anhydre de haute qualité (D12345), et la réaction est effectuée dans un tampon de bicarbonate de sodium de 0,1–0,2 M, de pH 8,3 et à température ambiante pendant 1 heure. Étant donné que le pKa de l’amine terminale est inférieur à celui du groupe amino de lysine epsilon, vous pouvez obtenir un marquage plus sélectif du terminus d’amine en utilisant un tampon plus proche du pH neutre.
Caractéristiques techniques
| Marque | Invitrogen |
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| Réf. B-LABO | BL-RE-129481 |
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| Réf. fabricant | 11524017 |
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| À utiliser avec (application) | Chimie de marquage, marquage et réticulation des protéines |
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| Quantité | 5 mg |
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| Type de produit | Ester NHS Alexa Fluor™ 647 (ester succinimidylique) |
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| Plage de pH | 4 à 10 |
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| Poids moléculaire | ∽1 250 kDa |
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| Pureté | HPLC, 98 % à 647 nm |
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| Contenu et stockage | -5°C à -30°C |
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| Marqueur ou colorant | Alexa Fluor™ 594 |
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| Couleur | Bleu |
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| Émission | 672 nm |
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| Excitation | 651 nm |
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