Ester Alexa Fluor™ 405 NHS (ester succinimidyle)
L’Alexa Fluor™ 405 est un colorant fluorescent bleu dont l’utilisation est optimale avec le laser violet de 405 nm. Utilisé pour une génération de signal stable en imagerie et en cytométrie de flux, le colorant Alexa Fluor™ 405 est hydrosoluble et insensible au pH de pH 4 à pH 10. En plus de formulations de colorants réactifs, nous proposons le colorant Alexa Fluor™ 405 conjugué à divers anticorps, peptides, protéines, traceurs et substrats d’amplification optimisés pour le marquage et la détection de cellules.
L’ester NHS (ou ester succinimidylique) de l’Alexa Fluor™ 405 est l’outil le plus populaire pour conjuguer ce colorant à une protéine ou à un anticorps. Les esters NHS peuvent être utilisés pour marquer des amines primaires (R-NH2) de protéines, d’oligonucléotides modifiés par des amines et d’autres molécules contenant des amines. Le conjugué Alexa Fluor™ résultant présentera une fluorescence plus lumineuse et une photostabilité plus élevée que les conjugués d’autres fluorophores similaires sur le plan spectral.
Colorant Alexa Fluor™ 405
esters NHS
Amines primaires sur des protéines et des ligands, oligonucléotides modifiés par des amines
400/424 nm
35 000 cm-1M-1
bleu pacifique
1028,3
Vous pouvez conjuguer des réactifs amino-réactifs avec pratiquement n’importe quelle protéine ou peptide (le protocole fourni est optimisé pour des anticorps IgG). Vous pouvez adapter la taille de la réaction à n’importe quelle quantité de protéine, mais la concentration de la protéine doit être d’au moins 2 mg/ml pour des résultats optimaux. Nous recommandons d’essayer trois degrés différents de marquage, en utilisant trois rapports molaires différents du réactif sensible à la protéine.
L’ester NHS Alexa Fluor™ est typiquement dissous dans du diméthylformamide (DMF) ou du diméthylsulfoxyde (DMSO) anhydre de haute qualité (D12345), et la réaction est effectuée dans un tampon de bicarbonate de sodium de 0,1 à 0,2 M, de pH 8,3 et à température ambiante pendant 1 heure. Parce que le pKa de l’amine terminale est inférieur à celui du groupe amino-epsilon de lysine, vous pouvez atteindre un marquage plus sélectif de l’extrémité de l’amine en utilisant un tampon proche du pH neutre.
| Marque | Molecular Probes |
|---|---|
| Réf. B-LABO | BL-RE-129535 |
| Réf. fabricant | 10153622 |
| Quantité | 1 mg |
| Type de produit | Colorant |
| Solubilité | DMSO (diméthylsulfoxyde) |
| Contenu et stockage | Contient 1 flacon (1 mg). </li></ul> Conserver au congélateur (-5 à -30°C) à l’abri de la lumière. |
| Réactivité chimique | Amine |
| Méthode de détection | Fluorescent |
| Faisceaux laser du cytomètre en flux | 405 nm |
| Conditions d’expédition | Température ambiante |
| Groupement de réactifs | Ester actif, ester de succinimidyle |
| Marqueur ou colorant | Alexa Fluor™ 405 |
| Type d’étiquette | Colorants Alexa Fluor |
| Gamme de produits | Alexa Fluor™ |
| Émission | 421 nm |
| Excitation | 401 nm |
