Alexa Fluor™ 633 est un colorant rouge lointain vif et photostable, avec un niveau d’excitation parfaitement adapté à la ligne laser de 633 nm. Utilisé pour une génération de signal stable en imagerie et en cytométrie de flux, le colorant Alexa Fluor™ 633 est hydrosoluble et insensible au pH de pH 4 à pH 10. Invisible pour l’œil humain, la fluorescence de ce colorant Alexa Fluor™ à grande longueur d’onde peut être facilement détectée par la plupart des systèmes d’imagerie. En plus des formulations de colorants réactifs, nous proposons le colorant Alexa Fluor™ 633 conjugué à divers anticorps, peptides, protéines, traceurs et substrats d’amplification optimisés pour le marquage et la détection cellulaires. L’ester NHS (ou ester de succinimidyle) Alexa Fluor™ 633 est l’outil le plus populaire pour conjuguer ce colorant d'une protéine ou à un anticorps. Les esters NHS peuvent être utilisés pour marquer des amines primaires (R-NH
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) de protéines, d’oligonucléotides modifiés par des amines et d’autres molécules contenant des amines. Le conjugué Alexa Fluor™ qui en résulte présente une plus grande fluorescence et une meilleure photostabilité que les conjugués d’autres fluorophores spectralement similaires.
Points forts
marquage du fluorophore
Colorant Alexa Fluor™ 633
Groupe de réactifs
Ester NHS
Réactivité
Amines primaires sur des protéines et des ligands, oligonucléotides modifiés par des amines
Ex/Em du conjugué
621/639 nm
Coefficient d’extinction
159 000 cm-1M-1
Colorants similaires sur le plan spectral
Cy5™
Réaction de conjugaison classique
Vous pouvez conjuguer des réactifs amino-réactifs avec pratiquement n’importe quelle protéine ou peptide (le protocole fourni est optimisé pour des anticorps IgG). Vous pouvez adapter la taille de la réaction à n’importe quelle quantité de protéine, mais la concentration de la protéine doit être d’au moins 2 mg/ml pour des résultats optimaux. Nous vous recommandons d’essayer trois degrés différents de marquage, à l’aide de trois rapports molaires différents entre le réactif et la protéine.
L’ester NHS Alexa Fluor™ est typiquement dissolu dans du diméthylformamide (DMF) ou du diméthylsulfoxyde (DMSO) anhydre de haute qualité (D12345), et la réaction est effectuée dans un tampon de bicarbonate de sodium de 0,1–0,2 M, de pH 8,3 et à température ambiante pendant 1 heure. Étant donné que le pKa de l’amine terminale est inférieur à celui du groupe amino de lysine epsilon, vous pouvez obtenir un marquage plus sélectif du terminus d’amine en utilisant un tampon plus proche du pH neutre.
Caractéristiques techniques
| Marque | Invitrogen |
| Réf. B-LABO | BL-RE-130027 |
| Réf. fabricant | 10595353 |
| Quantité | 1 mg |
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| Type de produit | Ester NHS (ester succinimidylique) |
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| Contenu et stockage | Conserver au congélateur (-5 à -30°C) à l’abri de la lumière. |
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| Réactivité chimique | Amine |
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| Conditions d’expédition | Température ambiante |
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| Groupement de réactifs | Ester actif, ester de succinimidyle |
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| Marqueur ou colorant | Alexa Fluor™ 633 |
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| Type d’étiquette | Colorants Alexa Fluor |
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| Gamme de produits | Alexa Fluor™ |
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| Émission | 639 nm |
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| Excitation | 621 nm |
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