Étudiez l’expression des protéines par spectrométrie de masse quantitative à l’aide des composés de marquage d’amines de masse totale égale (isobarique) mais d’ions rapporteurs différents.
Description
Kit de marquage de masse isobare Pierce TMTduplex
À utiliser avec (équipement)
Spectromètre de masse
Gamme de produits
TMTduplex™
Contenu et stockage
Suffisant pour : 5 expériences en duplex (5 x 2 voies) complètes • Réactif de marquage TMT0, 5 x 0,8 mg • Réactif de marquage TMT2-126, 5 x 0,8 mg, • Réactif de marquage TMT2-127, 5 x 0,8 mg • Tampon de dissolution (bicarbonate de triéthylamine à 1 M), 5 ml • Réactif de dénaturation (SDS à 10 %), 1 ml • Réactif de réduction (TCEP à 0,5 M), 1 ml • Iodoacétamide, 12 x 9 mg • Réactif d’extinction (hydroxylamine à 50 %), 1 ml • Trypsine, 2 x 20 µg • Solution de conservation de la trypsine, 250 µl • Albumine, bovin, 2,5 mg
Conserver à -20°C.
Marqueur ou colorant
Marquages Tandem Mass Tag™ (TMT)
Marque
Thermo Scientific
Les kits et réactifs de marquage de masse isobare Thermo Scientific™ TMT réactifs aux amines permettent un marquage quantitatif des protéines extraites de cellules et de tissus pour l’identification et l’analyse par spectrométrie de masse.
Les changements dans l’expression des protéines et les modifications après la traduction sont des mécanismes essentiels de la régulation biologique et de la maladie. Les avancées en matière d’instruments de spectrométrie de masse (MS), de bioinformatique et de méthodes de quantification, telles que la quantification sans marquage, le marquage métabolique et le marquage chimique, permettent désormais aux chercheurs d’identifier et d’analyser quantitativement des milliers de protéines dans un échantillon donné avec un degré élevé de précision.
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Points forts
Points clés
Activation de l’identification et de la quantification des protéines à partir de plusieurs échantillons de cellules, de tissus ou de liquides biologiques. Une chimie cohérente permettant une transition efficace du développement de méthodes à quantification multiplex, permettant ainsi la recherche sur la découverte de biomarqueurs
Marquage efficace des protéines membranaires et modifiées après traduction. Système évolutif permettant le multiplexage simultané d’un maximum de six échantillons différents au cours d’une seule expérience
Fragmentation optimisée et quantification entièrement prises en charge avec Proteome Discoverer 1.0 pour toutes les plateformes LC MS/MS Thermo Scientific, telles que les systèmes LTQ XL et LTQ Orbitrap XL
Chaque marqueur TMT est basé sur la même structure chimique, éliminant ainsi la nécessité de modifier les conditions de marquage ou les conditions de séparation HPLC entre les expériences
Les tags comprennent le TMT0, l’ensemble TMT2 two-plex et l’ensemble TMT6 six-plex
Le tag TMT0 permet de tester et d’optimiser la préparation des échantillons, le marquage, le fractionnement et la fragmentation MS pour l’identification des peptides et la détection des rapporteurs sans utiliser des composés plus coûteux, marqués par des isotopes
L’ensemble de réactifs TMT2 permet d’effectuer un profilage duplex des protéines pour les études de petite taille
L’ensemble de réactifs TMT6 permet d’effectuer un profilage hexaplex des protéines dans de multiples conditions, notamment les temps de traitement, les réponses aux doses, les réplicats ou les comparaisons d’échantillons multiples.
Recommandées dans les cas suivants
Profilage de l’expression protéique des états normaux par rapport aux états pathologiques ou témoins par rapport aux états traités
Analyse quantitative des protéines pour lesquelles aucun anticorps n’est disponible
Identification et quantification des protéines membranaires et modifiées après la traduction
Caractéristiques techniques
Marque
Thermo Scientific
Réf. B-LABO
BL-RE-130112
Réf. fabricant
10686574
À utiliser avec (équipement)
Spectromètre de masse
Gamme de produits
TMTduplex™
Contenu et stockage
Suffisant pour : 5 expériences en duplex (5 x 2 voies) complètes<br>• Réactif de marquage TMT0, 5 x 0,8 mg<br>• Réactif de marquage TMT2-126, 5 x 0,8 mg,<br>• Réactif de marquage TMT2-127, 5 x 0,8 mg<br>• Tampon de dissolution (bicarbonate de triéthylamine à 1 M), 5 ml<br>• Réactif de dénaturation (SDS à 10 %), 1 ml<br>• Réactif de réduction (TCEP à 0,5 M), 1 ml<br>• Iodoacétamide, 12 x 9 mg<br>• Réactif d’extinction (hydroxylamine à 50 %), 1 ml<br>• Trypsine, 2 x 20 µg<br>• Solution de conservation de la trypsine, 250 µl<br>• Albumine, bovin, 2,5 mg<br><br>Conserver à -20°C.
Marqueur ou colorant
Marquages Tandem Mass Tag™ (TMT)
Matériau de départ
Lysat cellulaire
Type de produit final
Protéine
Méthode de détection
Spectrométrie de masse
Étape du flux de travail
Marquage des protéines
Quantité
15 reactions
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