Réf. : BL-RE-130416Réf. fabricant : 15295653 5 x 1°mg
522,00 € HT
Marquez les glycoprotéines pour la purification d’affinité avec les microbilles de streptavidine
Formule
Desthiobiotine activée par hydrazide avec espaceur de tétraéthylèneglycol
Type de produit
Hydrazide-PEG4-desthiobiotine EZ-Link, format No-Weigh
Quantité
5 x 1°mg
Suffisant pour
5 utilisations pour étiqueter un total de 2 mg d’IgG dans des conditions normales
Contenu et stockage
4°C ; -20°C comme solution mère
Marque
Thermo Scientific
L’hydrazide-PEG4-desthiobiotine Thermo Scientific EZ-Link est un réactif de marquage pégylé réactif au carbonyle dont le groupe similaire à la biotine est éluable à partir de la streptavidine, permettant ainsi son utilisation pour le marquage et la purification des glycoprotéines de surface cellulaireCette variante de la desthiobiotine de la biotine est activée pour marquer les glucides oxydés de périodate des macromolécules. Le groupe hydrazide se conjugue à des carbonyles (aldéhydes et cétones), tels que ceux créés avec l’acide sialique et d’autres composants du csucre de polysaccharides de glycoprotéines lors du traitement avec 1 à 10 mm de périodate de sodium (NaIO4). Le marqueur de la desthiobiotine se lie à la streptavidine et à d’autres protéines liant la biotine à haute spécificité mais s’éloigne facilement avec des conditions douces (par ex., par déplacement compétitif avec la biotine stable et libre). À ce titre, ce réactif est une alternative utile à l’hydrazide-PEG4-Biotine (N° réf. 21360) pour les techniques d’avidine-biotine dans lesquelles l’élution non dénaturante des protéines marquées est souhaitée. Le bras espaceur hydrophile en polyéthylène glycol (PEG) à 4 unités améliore la solubilité et réduit l’agrégation des protéines marquées stockées en solution. Le segment PEG ajoute également de la longueur et de la flexibilité au bras espaceur, ce qui minimise l’encombrement stérique associé à la liaison aux molécules d’avidine. Le format No-Weigh (5 x 1 mg flacons refermables de x mg) élimine les difficultés associées à la pesée de petites quantités de réactif et optimise la protection du réactif inutilisé contre la dégradation.
Points forts
Points clés
La desthiobiotine - analogue de la biotine permet une élution facile à partir de la streptavidine, une caractéristique idéale pour les applications de purification par affinité
Marquage des glycoprotéines - marque les protéines glycosylées dans des résidus d’acide sialique pour permettre une récupération élevée dans des analyses de co-précipitation avec des microbilles de streptavidine
Marquage de la surface cellulaire - marque et isole les glycoprotéines de la surface cellulaire ; le réactif ne pénètre pas les membranes des cellules entières
Réactif à l’aldéhyde - réagit avec les aldéhydes formés par l’oxydation périodate des groupes de sucres
Activé par hydrazide - réalisez des réaction à un pH de 4 à 6 dans des tampons tels que l’acétate de sodium
Pégylé - le bras espaceur contient un groupe hydrophile de polyéthylène glycol (PEG) à 4 unités
Desthiobiotine vs Biotine
La desthiobiotine est un analogue de la biotine sans soufre à cycle unique qui se lie à la streptavidine avec une spécificité presque égale mais avec moins d’affinité que la biotine (1/Kd = 10^11 vs 10^15M, respectivement) [1-2]. Par conséquent, les protéines d’appât déthiobiotinylées et leurs partenaires en interaction peuvent être facilement et spécifiquement éluées de la résine d’affinité de streptavidine en utilisant des conditions douces basées sur un déplacement compétitif avec la biotine libre. Pour les expériences de dosage par extraction avec des échantillons biologiques, cette caractéristique de libération douce de la desthiobiotine permet également de minimiser la co-purification de molécules biotinylées endogènes, qui restent liées à la streptavidine lors de l’élution des complexes protéiques cibles avec la biotine libre. Le système d’affinité avidine-biotine modifié élimine également la nécessité d’utiliser des conditions d’élution difficiles qui peuvent dissocier des complexes et/ou endommager la protéine ou la cellule cible. Les techniques basées sur la desthiobiotine sont idéales lorsque vous utilisez des protéines natives ou recombinantes qui ne sont pas exprimées avec un marqueur de fusion et lorsque vous isolez des protéines capturées dans des conditions natives, telles que le ciblage de cellules intactes ou de protéines de surface cellulaire.
Marquage avec réactifs hydrazide :
Caractéristiques techniques
Marque
Thermo Scientific
Réf. B-LABO
BL-RE-130416
Réf. fabricant
15295653
Formule
Desthiobiotine activée par hydrazide avec espaceur de tétraéthylèneglycol
Type de produit
Hydrazide-PEG4-desthiobiotine EZ-Link, format No-Weigh
Quantité
5 x 1°mg
Suffisant pour
5 utilisations pour étiqueter un total de 2 mg d’IgG dans des conditions normales
Contenu et stockage
4°C ; -20°C comme solution mère
Une question, une configuration particulière ? Contactez-nous pour un devis.
