Kit innovant pour la préparation d’échantillons d’ARN à des fins d’analyse de microarray.
Type de produit
Kit d’amplification d’ARN
Contenu et stockage
• 33 µl de mélange enzymatique de première brin (-20°C) • 132 µl de mélange de tampon de premier brin (-20°C) • 66 µl de mélange enzymatique de deuxième brin (-20°C) • 165 µl de mélange de tampon de deuxième brin (-20°C) • 198 µl de mélange enzymatique T7 (-20°C) • 660 µl de mélange de biotine IVT T7 (-20°C) • 10 µl d’ARN de contrôle d’1 mg/ml (-20°C) • 1,75 ml d’eau exempte de nucléase (à n’importe quelle température) • 1,8 ml de concentrat de tampon de liaison d’aRNA (température ambiante) • 360 µl de microbilles de liaison à l’ARN (4°C) • 10 ml de concentrat de solution de lavage d’aRNA (température ambiante) • 5 ml de solution d’élution d’aRNA (4°C ou température ambiante) • 1 ml de tampon de fragmentation de réseau 5X (température ambiante) • 20 x 8 barrettes de tubes PCR et
Comprend l’étiquette ou le colorant
Oui
Méthode d’étiquetage
Marquage direct
Transcriptase inverse
ArrayScript™
Marque
Invitrogen
Le kit utilise la méthodologie éprouvée pour la préparation et l’étiquetage des échantillons d’ARN basée sur la technologie d’amplification de transcription in vitro (IVT) T7 originale, connue sous le nom de méthode de transcription Eberwine ou de transcription inverse-IVT (RT-IVT). La méthode RT-IVT est considérée comme la référence pour la préparation d’échantillons dans le profilage d’expression basé sur des microarrays. Elle est bien documentée dans la littérature scientifique actuelle et a été validée expérimentalement grâce au procédé RT-PCR TaqMan™. S’appuie sur la méthode d’amplification d’ARN linéaire et les réactifs développés pour les kits MessageAmp™ II avec des améliorations créant un flux de travail simplifié, des performances améliorées et des exigences d’entrée d’ARN plus flexibles. Utilisation du kit d’amplification d’ARN MessageAmp PremierBasée sur cette stratégie éprouvée d’amplification enzymatique et d’étiquetage, la procédure MessageAmp Premier commence par une simple réaction de synthèse d’ADNc utilisant la transcriptase inverse ArrayScript™. Aucune étape de nettoyage n’est requise après la TI ; l’ADNc est utilisé directement dans une réaction IVT à haut rendement à l’aide de la technologie MEGAscript. L’IVT est configurée pour incorporer le nucléotide modifié, biotine-UTP, dans l’ARNa synthétisé. (Dans ce protocole, l’ARN amplifié est appelé ARNa ; dans la littérature, il est aussi communément appelé ARNc.) Une fois purifié, l’ARNa peut être utilisé sur les plateformes microarray d’analyse d’expression génétique conçues pour des échantillons d’ARN antisens modifiés à la biotine.
Points forts
Exigences d’entrée d’ARN les plus faibles pour un seul tour d’amplification
Marquage de matrice d’expression, analyse et génotypage d’expression de gènes, analyse de microarray, amplification d’ARN
20 ng d’ARN total produisent suffisamment d’ARNa modifié à la biotine pour la plupart des formats de microarrays, avec des résultats équivalents à ceux obtenus à partir d’échantillons préparés à partir de matériaux de départ significativement plus volumineux à l’aide d’autres kits RT-IVT
Informations sur la commande
Conditions d’expédition : Glace carbonique
Caractéristiques principales
Exigences d’entrée d’ARN très flexibles : 20-500 ng d’ARN total, selon le type de tissu ou de cellule
Flux de travail rationalisé : selon les quantités d’entrée d’ARN, un seul jour de traitement est nécessaire pour effectuer une expérience microarray
Protocole simplifié et réactifs rationalisés
Kit complet : tout ce qui est nécessaire pour préparer l’ARNa modifié par la biotine est inclus
Contrôle de qualité rigoureux incluant l’analyse GeneChip™
L’IVT T7 MEGAscript™ offre une amplification jusqu’à 50 000 fois
Format tube unique
Purification d’ARNa à billes magnétiques, facile à utiliser et à récupération élevée
Caractéristiques techniques
Marque
Invitrogen
Réf. B-LABO
BL-RE-130579
Réf. fabricant
10126824
Type de produit
Kit d’amplification d’ARN
Contenu et stockage
• 33 µl de mélange enzymatique de première brin (-20°C)<br>• 132 µl de mélange de tampon de premier brin (-20°C)<br>• 66 µl de mélange enzymatique de deuxième brin (-20°C)<br>• 165 µl de mélange de tampon de deuxième brin (-20°C)<br>• 198 µl de mélange enzymatique T7 (-20°C)<br>• 660 µl de mélange de biotine IVT T7 (-20°C)<br>• 10 µl d’ARN de contrôle d’1 mg/ml (-20°C)<br>• 1,75 ml d’eau exempte de nucléase (à n’importe quelle température)<br>• 1,8 ml de concentrat de tampon de liaison d’aRNA (température ambiante)<br>• 360 µl de microbilles de liaison à l’ARN (4°C)<br>• 10 ml de concentrat de solution de lavage d’aRNA (température ambiante)<br>• 5 ml de solution d’élution d’aRNA (4°C ou température ambiante)<br>• 1 ml de tampon de fragmentation de réseau 5X (température ambiante)<br>• 20 x 8 barrettes de tubes PCR et
