Utilisez une méthode robuste et rationalisée pour enrichir les interactions protéine-ARN en utilisant l’ARN marqué comme appât avec le kit de coprécipitation d’ARN magnétique-protéine Thermo Scientific™ Pierce.
Capacité (métrique)
50 pmol d’ARN par réaction
Contenu et stockage
Suffisant pour : 20 réactions d’extraction de complexes ARN-protéine • Microbilles magnétiques de streptavidine compatibles avec les acides nucléiques Pierce, 1 ml (stocker à 4°C) • Tampon de capture de l’ARN (1X), 10 ml (stocker à 4°C) • Tris (20 mM, pH de 7,5), 5 ml (stocker à 4°C) • Tampon de liaison protéine-ARN (10X), 1 ml (stocker à 4°C) • Tampon de lavage (1X), 10 ml (stocker à 4°C) • Tampon d’élution de la biotine, 1,5 ml (stocker à 4°C) • Anticorps monoclonal HuR (souris), 50 µl (stocker à 4°C) • Contrôle ARN positif (ARN RA), 250 pmol (stocker à -20°C) • Contrôle ARN négatif (ARN polyA25), 250 pmol (stocker à -20°C) • Kit de desthiobiotinylation de l’extrémité 3’ de l’ARN Pierce (numéro de pièce 20163 ; stocker à -20°C)
Gamme de produits
Pierce™
Quantité
1 kit
Type
Kit de pull-down des protéines ARN
Marque
Thermo Scientific
Informations complémentaires et commande en ligne
Le kit de pull-down magnétique des complexes ARN-protéine comprend des réactifs pour réaliser avec une grande efficacité des enrichissements en protéines de liaison à l’ARN (RBP) à l’aide de molécules d’ARN marquées à leur extrémité à la desthiobiotine et de microbilles magnétiques couplées à la streptavidine. Le kit complet contient suffisamment de réactifs pour 20 réactions de marquage de l’ARN et 20 pull-downs de complexes ARN-protéine. Ce système d’enrichissement direct en complexes ARN-protéine constitue une alternative aux techniques de capture par anticorps de complexes protéine-ARN ou de groupes incorporés dans l’acide nucléique. Un autre avantage du kit est qu’il comprend des contrôles validés pour le marquage et le pull-down. Les échantillons préparés avec le kit sont directement utilisables pour l’analyse par différentes techniques, notamment le western blot et la spectrométrie de masse (MS).
Points forts
Points clés
Direct : capture des complexes ribonucléoprotéiques directement avec l’ARN marqué à son extrémité ; n’utilise pas et n’a pas besoin d’anticorps pour l’extraction
Facile à utiliser : enrichissement des RBP sans godets de centrifugation ni aucune centrifugation ; procédure optimisée pour réduire au minimum le temps opérateur (moins de 3 heures) après la réaction de marquage de l’ARN
Flexible : utilisez de l’ARN transcrit in vitro ou de l’ARN synthétique pour le marquage de longueurs et de complexité diverses ; protéines enrichies avec succès à l’aide de lysats traduits endogènes, surexprimés et in vitro
Spécifique : faible bruit de fond dû aux microbilles ; l’ARN non apparenté ou muté n’enrichit pas de manière significative les RBP spécifiées
Économique : solution moins chère que l’achat séparé d’ARN marqué à l’extrémité synthétique, de microbilles magnétiques et de réactifs
Complet : contient un module de marquage et un module d’enrichissement avec les tampons nécessaires pour le dosage ; ARN de contrôle positif, ARN de contrôle négatif et anticorps anti-RBP inclus
Comprend
Kit complet comprenant le kit de desthiobiotinylation de l’extrémité 3’ de l’ARN Pierce, des contrôles ARN positif et négatif, des microbilles magnétiques de streptavidine compatibles avec les acides nucléiques et des tampons pour l’enrichissement et l’élution des RBP
Matériel nécessaire
L’ARN et le lysat sont à fournir par l’utilisateur (échantillon expérimental)
Recommandé dans les cas suivants
Analyse mutationnelle
Analyse des fonctions structurelles
Identification de l’ARN : interactions protéiques
Analyse MS de l’ARN inconnu : paires ou complexes de liaison protéique
Caractéristiques techniques
Marque
Thermo Scientific
Réf. B-LABO
BL-RE-151899
Réf. fabricant
13444209
Capacité (métrique)
50 pmol d’ARN par réaction
Contenu et stockage
Suffisant pour : 20 réactions d’extraction de complexes ARN-protéine<br>• Microbilles magnétiques de streptavidine compatibles avec les acides nucléiques Pierce, 1 ml (stocker à 4°C)<br>• Tampon de capture de l’ARN (1X), 10 ml (stocker à 4°C)<br>• Tris (20 mM, pH de 7,5), 5 ml (stocker à 4°C)<br>• Tampon de liaison protéine-ARN (10X), 1 ml (stocker à 4°C)<br>• Tampon de lavage (1X), 10 ml (stocker à 4°C)<br>• Tampon d’élution de la biotine, 1,5 ml (stocker à 4°C)<br>• Anticorps monoclonal HuR (souris), 50 µl (stocker à 4°C)<br>• Contrôle ARN positif (ARN RA), 250 pmol (stocker à -20°C)<br>• Contrôle ARN négatif (ARN polyA<sub>25</sub>), 250 pmol (stocker à -20°C)<br>• Kit de desthiobiotinylation de l’extrémité 3’ de l’ARN Pierce (numéro de pièce 20163 ; stocker à -20°C)
Gamme de produits
Pierce™
Quantité
1 kit
Type
Kit de pull-down des protéines ARN
Suffisant pour
20 réactions
Format
Kit
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