Les réactifs Thermo Scientific iodoTMT Label permettent l'identification et la quantification multiplexées des peptides contenant de la cystéine dans différents échantillons par spectrométrie de masse en tandem. Les réactifs IodoTMT sont des ensembles d'isomères isobares (masse et structure) activés par l'iodoacétyle pour le marquage covalent et irréversible des groupes sulfhydryle (–SH). Le réactif de marquage iodoTMTzero permet de tester et d'optimiser la préparation des échantillons, le marquage, le fractionnement et la fragmentation MS pour l'identification des peptides et la détection des rapporteurs sans utiliser les composés marqués aux isotopes, plus coûteux.
Les réactifs de marquage de masse en tandem à l’iodoacétyle permettent le marquage sélectif de peptides contenant de la cystéine pour la quantification d’échantillons multiplexés au moyen d’une analyse LC-MS/MS. Comme l’iodoacétamide, les réactifs iodoTMT réagissent spécifiquement avec les cystéines réduites (Cys) dans les peptides et les protéines et permettent de quantifier l’abondance relative des modifications des cystéines, telles que la S-nitrosylation et l’oxydation des liaisons disulfures. Les réactifs IodoTMT marquent de manière irréversible les groupes sulfhydryles libres sur les résidus de cystéine, contrairement aux réactifs TMT réversibles réagissant à la cystéine (cysTMT). Pour analyser sélectivement les peptides marqués à la cystéine, l’échantillon peut être enrichi à l’aide d’une résine d’anticorps anti-TMT immobilisée (Réf. n° 90076) et d’un tampon d’élution TMT (Réf. n° 90104). Cette approche de marquage sélectif des thiols et d’enrichissement par affinité est similaire aux marqueurs d’affinité codés par isotope (méthode ICAT), mais permet un enrichissement par affinité avec un marqueur non biologique et une quantification multiplex plus élevée. Caractéristiques des réactifs iodoTMT • Spécifiques—ne réagissent qu’avec les groupes sulfhydryles (résidus de cystéine réduits et non modifiés) • Irréversiblee—les protéines et les peptides marqués ne sont pas sensibles aux agents réducteurs • Flexibles—options pour la quantification isotopique duplex (MS) ou isobarique sixplex (MS/MS) • Polyvalents—peuvent être utilisés pour étudier les modifications des cystéines (par exemple, les ponts di-sulfures, la S-nitrosylation)
Caractéristiques techniques
| Marque | Thermo Scientific |
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| Réf. B-LABO | BL-RE-152236 |
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| Réf. fabricant | 13404289 |
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| À utiliser avec (équipement) | Spectromètre de masse |
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| Gamme de produits | iodoTMTzero™ |
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| Contenu et stockage | Stocker à –20°C. |
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| Marqueur ou colorant | Marquages Tandem Mass Tag™ (TMT) |
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| Matériau de départ | Lysat cellulaire |
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| Type de produit final | Protéine |
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| Méthode de détection | Spectrométrie de masse |
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| Étape du flux de travail | Marquage des protéines |
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| Quantité | 5 x 0,2 mg |
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