Ester NHS Alexa Fluor™ 790 (ester de succinimidyle)
Alexa Fluor™ 790 est un colorant brillants et photostable proche de l’infrarouge qui est spectralement similaire au vert d’indocyanine (ICG) et au colorant IRDye™ 800. Utilisé pour une génération de signal stable en imagerie et en cytométrie de flux, le colorant Alexa Fluor™ 790 est hydrosoluble et insensible au pH de pH 4 à pH 10. Invisible pour l’œil humain, la fluorescence de ce colorant Alexa Fluor™ à grande longueur d’onde peut être facilement détectée par la plupart des systèmes d’imagerie. En tant que colorant Alexa Fluor™ à la plus longue longueur d’onde, l’émission est bien séparée des fluorophores rouge lointain couramment utilisés, tels que le colorant Alexa Fluor™ 647 ou l’allophycocyanine (APC), facilitant ainsi l’analyse multicolore. Ce fluorophore devrait également être utile pour les applications d’imagerie in vivo chez les petits animaux (SAIVI) ou pour les applications Western à deux couleurs avec le système d’imagerie infrarouge LI-COR™ Odyssey™. En plus des formulations de colorants réactifs, nous proposons le colorant Alexa Fluor™ 790 conjugué à divers anticorps, peptides, protéines, traceurs et substrats d’amplification optimisés pour le marquage et la détection cellulaires. L’ester NHS (ou ester de succinimidyle) Alexa Fluor™ 790 est l’outil le plus populaire pour conjuguer ce colorant d'une protéine ou à un anticorps. Les esters NHS peuvent être utilisés pour marquer des amines primaires (R-NH
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) de protéines, d’oligonucléotides modifiés par des amines et d’autres molécules contenant des amines. Le conjugué Alexa Fluor™ qui en résulte présente une plus grande fluorescence et une meilleure photostabilité que les conjugués d’autres fluorophores spectralement similaires.
Colorant Alexa Fluor™ 790
Ester NHS
Amines primaires sur des protéines et des ligands, oligonucléotides modifiés par des amines
784/814 nm
260 000 cm-1M-1
vert d’indocyanine (ICG) et colorant IRDye™ 800
∼ 1750
Vous pouvez conjuguer des réactifs amino-réactifs avec pratiquement n’importe quelle protéine ou peptide (le protocole fourni est optimisé pour des anticorps IgG). Vous pouvez adapter la taille de la réaction à n’importe quelle quantité de protéine, mais la concentration de la protéine doit être d’au moins 2 mg/ml pour des résultats optimaux. Nous vous recommandons d’essayer trois degrés différents de marquage, à l’aide de trois rapports molaires différents entre le réactif et la protéine.
L’ester NHS Alexa Fluor™ est typiquement dissolu dans du diméthylformamide (DMF) ou du diméthylsulfoxyde (DMSO) anhydre de haute qualité (D12345), et la réaction est effectuée dans un tampon de bicarbonate de sodium de 0,1–0,2 M, de pH 8,3 et à température ambiante pendant 1 heure. Étant donné que le pKa de l’amine terminale est inférieur à celui du groupe amino de lysine epsilon, vous pouvez obtenir un marquage plus sélectif du terminus d’amine en utilisant un tampon plus proche du pH neutre.
| Marque | Molecular Probes |
|---|---|
| Réf. B-LABO | BL-RE-158424 |
| Réf. fabricant | 13423319 |
| Quantité | 10 mg |
| Type de produit | Colorant |
| Contenu et stockage | 1 tube<br>Conserver sous forme desséchée à -20°C, dès réception |
| Conditions d’expédition | Température ambiante |
| Gamme de produits | Alexa Fluor™ |
| Émission | 814 nm |
| Excitation | 784 nm |
