Le kit ViralSEQ Quantitative Sf-Rhabdovirus est un test RT-qPCR en deux étapes pour la détection du Sf-rhabdovirus dans les lignées cellulaires Sf9/Sf21 et dans des produits tels que protéines recombinantes, AAV et VLP fabriqués à l’aide de systèmes d’expression baculovirus. Ce test s’appuie sur une amorce RT étiquetée contenant une séquence non virale, permettant une quantification spécifique et exacte de l’ARN génomique de polarité négative du Sf-rhabdovirus. On obtient ainsi une quantification plus exacte de la charge virale réelle, en évitant la surestimation généralement due à l’ARNm dans les tests non spécifiques du brin.
Points forts
Caractéristiques du kit ViralSEQ Quantitative Sf-Rhabdovirus
• Test RT-PCR spécifique du brin négatif pour une quantification exacte du Sf-rhabdovirus
• Spécifique de l’ARN génomique du Sf-rhabdovirus ; non affecté par la présence d’ARNm de polarité positive ; aucune réactivité croisée avec des ADN/ARN non apparentés
Solution de flux de travail intégrée
Le kit ViralSEQ Quantitative Sf-Rhabdovirus fait partie d’un flux de travail intégré de contrôle des impuretés et des contaminants au cours de la fabrication biopharmaceutique. Le kit est compatible avec le kit PrepSEQ Nucleic Acid Sample Preparation (réf. A50485), qui propose un flux de préparation des échantillons manuel ou automatisé. L’étape RT est réalisée sur le thermocycleur Veriti 96 puits Fast (configuration bloc 0,1 mL). Pour la PCR en temps réel, le kit ViralSEQ a été validé sur le système de PCR en temps réel Applied Biosystems 7500 Fast et sur le système de PCR en temps réel Applied Biosystems QuantStudio 5. L’analyse des données est simplifiée grâce au logiciel de détection par PCR en temps réel AccuSEQ, qui offre une quantification précise ainsi que des fonctions de sécurité, d’audit et de signature électronique facilitant la conformité au 21 CFR Part 11.
Caractéristiques techniques
| Marque | Applied Biosystems |
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| Réf. B-LABO | BL-EQ-162716 |
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| Réf. fabricant | 18705435 |
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| Contenu et stockage | <strong>Réactifs PCR ARN Sf-Rhabdovirus</strong><br /> • Mélange de test 10X, 275 μL, à l’abri de la lumière<br /> • Mélange enzymatique RT-PCR 25X, 110 μL<br /> • Tampon RT-PCR 2X, 1,375 mL<br /> • Amorce RT, 55 μL<br /> • Eau exempte de nucléases, 1,0 mL, conserver entre –15°C et –25°C jusqu’à la première utilisation. Après la première utilisation, conserver entre 2−8°C.<br /> Sauf indication contraire, conserver tous les composants entre –15°C et –25°C.<br /> <br /> <strong>Contrôle ARN Sf-Rhabdovirus</strong><br /> • Contrôle ARN Sf-rhabdovirus (1,25 x 10<sup>8</sup> copies/μL), 44 μL<br /> • Tampon de dilution ARN, 7 mL<br /> Conserver tous les composants entre –15°C et –25°C.<br /> <br /> <strong>Kit d’extraction d’acides nucléiques PrepSEQ</strong><br /> • Tampon de lyse (2 flacons, 50 mL/flacon)<br /> • Solution de liaison/isopropanol (1 flacon vide)<br /> • Tampon de lavage concentré (2 flacons, 26 mL/flacon)<br /> • Tampon d’élution (1 flacon, 25 mL)<br /> • Protéinas |
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| Méthode de détection | Primer-probe |
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| Méthode PCR | qPCR |
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| Gamme de produits | ViralSEQ™ |
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| Conditions d’expédition | Dry Ice |
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| Cible | Sf-rhabdovirus |
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| Nbre de réactions | Dosage : 100 réactions, préparation d’échantillons : 100 réactions |
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| Comprend | Kit quantitatif Sf-Rhabdovirus ViralSEQ™, kit de préparation d’échantillons d’acides nucléiques PrepSEQ™ |
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