Fournit tous les éléments nécessaires à un clonage efficace des produits de PCR extra-longs (jusqu’à 13 kb)
Souche bactérienne ou de levures
OmniMAX2
Résistance aux antibiotiques des bactéries
Ampicilline (AmpR), kanamycine (KanR)
Type de cellule
E. coli chimiquement compétentes
Méthode de clonage
Zero Blunt TOPO
Contenu et stockage
Boîte 1 : Conserver entre -5 à -30°C. • Vecteur pCR XL-2-TOPO • Solution saline • Amorce T3 • Amorce T7 • Modèle de PCR de contrôle XL • Amorces de PCR de contrôle XL • Master Mix Platinum SuperFi Green PCR • Amorce SuperFi GC • Eau exempte de nucléase
Boîte 2 : Conserver à température ambiante. • Tampon de solubilisation de gel (L3) • Tampon de liaison (B2) • Tampon de nettoyage (W1) • Tampon d’élution (E1) • Colonnes de centrifugation de nettoyage PureLink (dans les tubes de nettoyage) • Tubes de récupération/élution PureLink
Boîte 3 : •Cellules E. coli One Shot OmniMAX 2 T1R chimiquement compétentes • Milieu S.O.C. • ADN de contrôle pUC 19
Conserver les cellules compétentes et pUC19 entre -65 à -85°C.
Marque
Invitrogen
Le kit utilise le vecteur pCR™-XL-2-TOPO linéarisé et activé par topoisomérase 1, qui est compatible avec le clonage des fragments de PCR à extrémité arrondie. L’amplification de longs fragments de PCR est activée par le Master Mix Platinum™ SuperFi™ Green PCR, inclus dans le kit. L’activation de la topoisomérase I du vecteur permet aux produits PCR d’être ligaturés en seulement 5 minutes sur la paillaisse–top, et se traduit par une efficacité de clonage élevée (jusqu’à 90 % de recombinants positifs avec des fragments de 10 kb).
Le vecteur pCR-XL-2-TOPO comprend :
Le kit complet de clonage par PCR TOPO XL-2 comprend :
Caractéristiques principales
Gène ccdB pour une sélection positive
Site EcoR I encadrant le site d’insertion du produit de PCR, pour une excision simple des inserts
Gènes de résistance à l’ampicilline et à la kanamycine permettant de choisir la méthode de sélection d’E. coli
Site promoteur / amorce T7 pour la transcription et le séquençage de l’ARN in vitro
Sites d’amorce T7, T3 et M13 sens et antisens pour le séquençage
Kits de clonage par PCR TOPO XL-2 contenant le vecteur pCR-XL-2-TOPO
Master Mix pour PCR Platine SuperFi Green : doté d’une ADN polymérase à activité correctrice (fidélité > 100X par rapport à Taq) à haute processivité et d’un gradient de densité pour générer des amplicons PCR longs et précis prêts pour chargement sur gel d’agarose pour l’extraction sur gel
Kit mixte d’extraction rapide sur gel et de purification PCR PureLink™ : conçu pour purifier les fragments d’ADN à partir de gels d’agarose ou de PCR sens à l’aide d’une cartouche de centrifugation à base de silice en un temps < 30 minutes
Cellules E. coli One Shot™ OmniMAX™ 2 T1R chimiquement compétentes : une lignée cellulaire chimiquement compétente améliorée, idéale pour toutes les applications de clonage.
Caractéristiques techniques
Marque
Invitrogen
Réf. B-LABO
BL-RE-174887
Réf. fabricant
17856681
Souche bactérienne ou de levures
OmniMAX2
Résistance aux antibiotiques des bactéries
Ampicilline (AmpR), kanamycine (KanR)
Type de cellule
E. coli chimiquement compétentes
Méthode de clonage
Zero Blunt TOPO
Contenu et stockage
<b>Boîte 1 :</b> Conserver entre -5 à -30°C.<br>• Vecteur pCR XL-2-TOPO<br>• Solution saline<br>• Amorce T3<br>• Amorce T7<br>• Modèle de PCR de contrôle XL<br>• Amorces de PCR de contrôle XL<br>• Master Mix Platinum SuperFi Green PCR<br>• Amorce SuperFi GC<br>• Eau exempte de nucléase<br><br><b>Boîte 2 :</b> Conserver à température ambiante.<br>• Tampon de solubilisation de gel (L3)<br>• Tampon de liaison (B2)<br>• Tampon de nettoyage (W1)<br>• Tampon d’élution (E1)<br>• Colonnes de centrifugation de nettoyage PureLink (dans les tubes de nettoyage)<br>• Tubes de récupération/élution PureLink<br><br><b>Boîte 3 :</b><br>•Cellules E. coli One Shot OmniMAX 2 T1R chimiquement compétentes<br>• Milieu S.O.C. <br>• ADN de contrôle pUC 19<br><br>Conserver les cellules compétentes et pUC19 entre -65 à -85°C.<br><br>
Format
Kit
À utiliser avec (application)
Clonage PCR
Nbre de réactions
10 réactions
Gamme de produits
TOPO™
Type de produit
Kit de clonage
Accélérateur
T3, T7
Quantité
10 reactions
Conditions d’expédition
Approuvée pour l’expédition à température ambiante ou sur de la glace humide ou sèche
Vecteur
pCR-XL-2-TOPO
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