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Thermo Scientific™ Kit de synthèse d’ADNc premier brin Maxima H Minus

Réf. : BL-EQ-070925Réf. fabricant : 15797526 Kit avec dsDNase
546,00 € HT

Synthétisez des ADNc d’une longueur allant jusqu’à 20 kb à des températures élevées (jusqu’à 65°C) avec ce système complet pour une synthèse hautement efficace d’ADNc premier brin.

Contenu et stockage

• Mélange enzymatique H Minus Maxima
• DNasedb
• Tampon de DNasedb 10X
• Amorces Oligo(dT)18 et d’hexamères aléatoires
• Tampon RT 5X
• Mélange dNTP
• Eau exempte de nucléase

Conserver à –20°C.

Format
Kit
GC-Rich PCR Performance
Élevé
Vitesse de réaction
30 min
Technique
Transcription inverse
Marque
Thermo Scientific

Le kit de synthèse d’ADNc de premier brin Maxima H Minus† est un système complet permettant la synthèse très efficace de l’ADNc premier brin. Ce kit utilise la transcriptase inverse (RT) Maxima H Minus, qui est une enzyme avancée obtenue par évolution in vitro de la M-MuLV RT. L’enzyme présente la thermostabilité la plus importante parmi les dérivés de la M-MuLV RT et est dénuée de l’activité RNase H. Le kit de synthèse d’ADNc premier brin Maxima H Minus permet la synthèse d’ADNc d’une longueur allant jusqu’à 20 kb à des températures élevées (jusqu’à 65°C), supplantant les capacités d’autres systèmes à produire de l’ADNc pleine longueur. En raison des taux de synthèse accrus, la réaction peut être effectuée en 30 minutes.

Le nouveau kit de synthèse d’ADNc premier brin Maxima H Minus avec DNasedb offre un flux de travail considérablement simplifié qui combine l’élimination de l’ADN génomique et la synthèse d’ADNc en une procédure à un tube. Le kit contient une nouvelle DNase spécifique double brin (DNasedb) conçue pour éliminer l’ADN génomique contaminant des préparations d’ARN en 2 minutes sans nuire à la qualité ou à la quantité d’ARN. L’activité de la DNasedb hautement spécifique vers l’ADN double brin garantit que l’ADN simple brin (tel que l’ADNc et les amorces) n’est pas clivé et que l’ARN traité par la DNasedb peut être directement ajouté à la transcription inverse.

Ce kit utilise la transcriptase inverse (RT) Maxima H Minus, qui est une enzyme avancée obtenue par évolution in vitro de la M-MuLV RT. L’enzyme présente la thermostabilité la plus importante parmi les dérivés de la M-MuLV RT et est dénuée de l’activité RNase H. Le kit de synthèse d’ADNc premier brin Maxima H Minus permet la synthèse d’ADNc d’une longueur allant jusqu’à 20 kb à des températures élevées (jusqu’à 65°C), supplantant les capacités d’autres systèmes à produire de l’ADNc pleine longueur. En raison des taux de synthèse accrus, la réaction peut être effectuée en 30 minutes. Le nouveau kit de synthèse d’ADNc premier brin Maxima H Minus avec DNasedb offre un flux de travail considérablement simplifié qui combine l’élimination de l’ADN génomique et la synthèse d’ADNc en une procédure à un tube. Le kit contient une nouvelle DNase spécifique double brin (DNasedb) conçue pour éliminer l’ADN génomique contaminant des préparations d’ARN en 2 minutes sans nuire à la qualité ou à la quantité d’ARN. L’activité hautement spécifique de la DNasedb vers l’ADN double brin garantit que l’ADN simple brin (comme l’ADNc et les amorces) n’est pas clivé et que l’ARN traité par DNasedb peut être directement ajouté à la transcription inverse.Points clés

Points forts

Applications

  • Synthèse d’ADNc premier brin pour RT-PCR
  • Construction de bibliothèques d’ADNc
  • Génération de sondes pour hybridation
  • Synthèse d’ARN antisens

Contenu

Informations supplémentaires relatives aux composants de la réaction

Danger : NonContrôle qualité : Testé fonctionnellement en RT-PCR en utilisant 100 fg d’ARN GAPDH de contrôle et les amorces de contrôle GAPDH générant un produit de 496 bp sur un gel d’agarose à 1 % après coloration au bromure d’éthidium.Condition de conservation : -20°C

  • Le kit de synthèse d’ADNc premier brin Maxima H Minus contient le mélange enzymatique Maxima H Minus, les amorces Oligo(dT)18 et hexamères aléatoires, le tampon RT 5X, le mélange dNTP et de l’eau exempte de nucléase.
  • En plus des composants répertoriés ci-dessus, le kit de synthèse d’ADNc premier brin Maxima H Minus avec DNasedb contient la DNasedb et le tampon de la DNasedb 10X.
  • Le mélange enzymatique Maxima H Minus contient la transcriptase inverse Maxima H Minus et l’inhibiteur d’ARNase RiboLock. L’inhibiteur d’ARNase RiboLock protège efficacement les modèles d’ARN de la dégradation par les RNases A, B et C à des températures jusqu’à 55°C.
  • Lesamorces oligo(dT)18 et les amorces hexamères aléatoires sont fournies avec le kit. Les amorces hexamères aléatoires se lient de façon non spécifique et sont utilisées pour synthétiser l’ADNc à partir de tous les ARN d’une population d’ARN totaux. L’amorce oligo(dT)18 se fixe de manière sélective par hybridation à l’extrémité 3 de l’ARN poly(A), synthétisant l’ADNc uniquement à partir des ARNm à queue poly(A). Les amorces spécifiques aux gènes peuvent également être utilisées avec le kit pour amorcer la synthèse à partir d’une séquence donnée.
  • Le mélange dNTP 10 mM est une solution aqueuse pré-mélangée de dATP, dTTP, dCTP et dGTP
  • De l’eau exempte de nucléase est fournie pour la préparation de la réaction et la dilution des échantillons d’ADN. L’absence d’endo-, d’exodéoxyribonucléases, de ribonucléases et de phosphatases a été confirmée par des tests de qualité adéquats. †Attention, le nom de ce produit a changé. L’ancien nom était Synthèse d’ADNc premier brin RevertAid Premium

Caractéristiques principales

  • Étape d’élimination de l’ADN génomique intégrée
  • Augmentation des températures de réaction : le premier brin d’ADNc peut être synthétisé dans la plage de températures allant de 42 à 65°C.•Rendements élevés d’ADNc premier brin pleine longueur : avec modèles d’ARN jusqu’à 20 kb
  • Amorçage flexible : oligo(dT)18, hexamère aléatoire ou amorces spécifiques aux gènes

Caractéristiques techniques

MarqueThermo Scientific
Réf. B-LABOBL-EQ-070925
Réf. fabricant15797526
Contenu et stockage<p>• Mélange enzymatique H Minus Maxima <br />• DNasedb <br />• Tampon de DNasedb 10X <br />• Amorces Oligo(dT)<sub>18</sub> et d’hexamères aléatoires <br />• Tampon RT 5X <br />• Mélange dNTP <br />• Eau exempte de nucléase<br /><br />Conserver à –20°C.<br><br></p>
FormatKit
GC-Rich PCR PerformanceÉlevé
Vitesse de réaction30 min
TechniqueTranscription inverse
Température de réaction optimale50°C à 55°C
Transcriptase inverseMaxima H Minus
Activité de la ribonucléase HRéduction
Conditions d’expéditionNeige carbonique
À utiliser avec (application)PCR en temps réel (qPCR)
Type de produit finalADNc premier brin
Nbre de réactions100 réactions
Format de réactionComposants séparés
Type de réactifTranscription inverse
Taille (produit final)Jusqu’à 20 kb
Matériau de départARN
ComprendKit avec dsDNase

Documentation

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