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Invitrogen™ Kit de synthèse d’ADNc SuperScript™ III CellsDirect™

Réf. : BL-EQ-071337Réf. fabricant : 10442482
437,00 € HT

Optimisé pour synthétiser l’ADNc premier brin directement à partir d’un lysat de cellules de mammifères sans isoler l’ARN dans un premier temps. Le kit de synthèse d’ADNc Invitrogen™ SuperScript™ III CellsDirect™ comprend les réactifs, le tampon, l’amorce et d’autres matériaux nécessaires à la lyse et à la transcription inverse (sauf l’ADN polymérase).

Contenu et stockage
• RT SuperScript III• Inhibiteur de ribonucléase RNaseOUT• Amorces Oligo(dT)20• DNase I• Tampon de DNase I• EDTA• Mélange de dNTP• Tampon premier brin 5X• DTT (0,1 M)• RNase H• ARN de contrôle et armoces• Tampon de resuspension Conserver tous les composants à –20°C.Garantie stable pendant 6 mois sous réserve d’un stockage correct.
Format
Kit
GC-Rich PCR Performance
Élevé
Vitesse de réaction
50 min
Technique
Transcription inverse
Marque
Invitrogen

Le kite de synthèse d’ADNc SuperScript™ III CellsDirect™ utilise un protocole simple qui prend moins de 2 heures. La lyse et la transcription inverse sont effectuées dans le même tube et l’ADNc premier brin qui en résulte est prêt à être utilisé dans le clonage et la PCR.

FonctionnementDans la RT-PCR classique, l’ARN est d’abord isolé des cellules en effectuant une procédure chronophage pouvant entraîner une perte de matériau. Grâce au système de synthèse d’ADNc SuperScript™ III CellsDirect, les cellules sont lysées et l’ADNc est généré à partir du lysat dans un tube unique avec une manipulation minimale et aucune perte d’échantillon. La DNase I est ajoutée pour éliminer l’ADN génomique avant la synthèse premier brin. Ce kit a été optimisé pour les échantillons de petites cellules, allant de 10 000 cellules à une seule cellule (mesurée par dilution de série). L’utilisation de la transcriptase inverse SuperScript™ III garantit une spécificité et des rendements élevés d’ADNc à partir de petites quantités de produit de départ : seulement 10 pg d’ARN total. Après la synthèse, l’ADNc premier brin peut être amplifié avec des amorces spécifiques par la PCR sans extractions organiques intermédiaires ni précipitations à l’éthanol.

Caractéristiques principales

  • Compatible avec un large éventail de types de cellules de mammifères cultivés dans différentes conditions de traitement
  • Le format à tube unique minimise la perte de réactifs, la perte d’échantillons et le temps de manipulation
  • Le volume total de lysat est utilisé dans la réaction de synthèse d’ADNc premier brin, ce qui produit de meilleurs rendements avec un nombre limité de cellules et permet la détection de transcrits rares
  • La transcriptase inverse SuperScript™ III, avec une activité RNase H réduite et une stabilité thermique accrue, produit des rendements élevés d’ADNc dans la réaction de synthèse de premier brin, pour une sensibilité et une détection accrues des transcrits rares
  • Génère de l’ADNc de haute qualité pour une utilisation dans une variété d’applications, notamment le clonage et la PCR

Caractéristiques techniques

MarqueInvitrogen
Réf. B-LABOBL-EQ-071337
Réf. fabricant10442482
Contenu et stockage• RT SuperScript III• Inhibiteur de ribonucléase RNaseOUT• Amorces Oligo(dT)20• DNase I• Tampon de DNase I• EDTA• Mélange de dNTP• Tampon premier brin 5X• DTT (0,1 M)• RNase H• ARN de contrôle et armoces• Tampon de resuspension Conserver tous les composants à –20°C.Garantie stable pendant 6 mois sous réserve d’un stockage correct.
FormatKit
GC-Rich PCR PerformanceÉlevé
Vitesse de réaction50 min
TechniqueTranscription inverse
Température de réaction optimale50°C
Transcriptase inverseSuperScript III
Activité de la ribonucléase HRéduction
À utiliser avec (application)PCR en temps réel (qPCR)
Type de produit finalADNc premier brin
Nbre de réactions25 réactions
Format de réactionComposants séparés
Type de réactifTranscription inverse
Taille (produit final)Jusqu’à 4,5 kb
Matériau de départCellules

Documentation

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