"/>
Invitrogen™ Kit de synthèse d’ADNc SuperScript&tra… | B-LABO France
Invitrogen™ Kit de synthèse d’ADNc SuperScript™ III CellsDirect™
Réf. : BL-EQ-071338Réf. fabricant : 10694993
1 372,00 € HT
Optimisé pour synthétiser l’ADNc premier brin directement à partir d’un lysat de cellules de mammifères sans isoler l’ARN dans un premier temps. Le kit de synthèse d’ADNc Invitrogen™ SuperScript™ III CellsDirect™ comprend les réactifs, le tampon, l’amorce et d’autres matériaux nécessaires à la lyse et à la transcription inverse (sauf l’ADN polymérase).
Contenu et stockage
• Tampon de resuspension, 1 ml• Inhibiteur de ribonucléase recombinante RNaseOUT™, 200 μl (40 unités/μl)• DNase I, 500 μl (1 U/μl)• Tampon de DNase I 10X, 160 μl• EDTA 25 mM, 120 μl• Oligo(dT)20, 120 μl (50 μM)• Mélange de dNTP 10 mM, 100 μl• RT SuperScript™ III, 100 μl (200 unités/μl)• Tampon RT 5X, 600 μl• DTT, 100 μl (0,1 M)• RNase H d’E. coli, 100 μl (2 U/μl)• ARN total HeLa, 10 μl (10 ng/μl)• Amorces sens / antisens de contrôle, 10 μl (10 μM)• RNase H d’E. coli (2 U/μl)Conserver tous les composants à –20°C.
Format
Kit
GC-Rich PCR Performance
Élevé
Vitesse de réaction
50 min
Technique
Transcription inverse
Marque
Invitrogen
Le kite de synthèse d’ADNc SuperScript™ III CellsDirect™ utilise un protocole simple qui prend moins de 2 heures. La lyse et la transcription inverse sont effectuées dans le même tube et l’ADNc premier brin qui en résulte est prêt à être utilisé dans le clonage et la PCR.
FonctionnementDans la RT-PCR classique, l’ARN est d’abord isolé des cellules en effectuant une procédure chronophage pouvant entraîner une perte de matériau. Grâce au système de synthèse d’ADNc SuperScript™ III CellsDirect, les cellules sont lysées et l’ADNc est généré à partir du lysat dans un tube unique avec une manipulation minimale et aucune perte d’échantillon. La DNase I est ajoutée pour éliminer l’ADN génomique avant la synthèse premier brin. Ce kit a été optimisé pour les échantillons de petites cellules, allant de 10 000 cellules à une seule cellule (mesurée par dilution de série). L’utilisation de la transcriptase inverse SuperScript™ III garantit une spécificité et des rendements élevés d’ADNc à partir de petites quantités de produit de départ : seulement 10 pg d’ARN total. Après la synthèse, l’ADNc premier brin peut être amplifié avec des amorces spécifiques par la PCR sans extractions organiques intermédiaires ni précipitations à l’éthanol.
Caractéristiques principales
Compatible avec un large éventail de types de cellules de mammifères cultivés dans différentes conditions de traitement
Le format à tube unique minimise la perte de réactifs, la perte d’échantillons et le temps de manipulation
Le volume total de lysat est utilisé dans la réaction de synthèse d’ADNc premier brin, ce qui produit de meilleurs rendements avec un nombre limité de cellules et permet la détection de transcrits rares
La transcriptase inverse SuperScript™ III, avec une activité RNase H réduite et une stabilité thermique accrue, produit des rendements élevés d’ADNc dans la réaction de synthèse de premier brin, pour une sensibilité et une détection accrues des transcrits rares
Génère de l’ADNc de haute qualité pour une utilisation dans une variété d’applications, notamment le clonage et la PCR
Caractéristiques techniques
Marque
Invitrogen
Réf. B-LABO
BL-EQ-071338
Réf. fabricant
10694993
Contenu et stockage
• Tampon de resuspension, 1 ml• Inhibiteur de ribonucléase recombinante RNaseOUT™, 200 μl (40 unités/μl)• DNase I, 500 μl (1 U/μl)• Tampon de DNase I 10X, 160 μl• EDTA 25 mM, 120 μl• Oligo(dT)20, 120 μl (50 μM)• Mélange de dNTP 10 mM, 100 μl• RT SuperScript™ III, 100 μl (200 unités/μl)• Tampon RT 5X, 600 μl• DTT, 100 μl (0,1 M)• RNase H d’E. coli, 100 μl (2 U/μl)• ARN total HeLa, 10 μl (10 ng/μl)• Amorces sens / antisens de contrôle, 10 μl (10 μM)• RNase H d’E. coli (2 U/μl)Conserver tous les composants à –20°C.
