NucleoSpin 96 Virus permet une préparation simultanée rapide d’acides nucléiques viraux à partir de sérum, plasma ou tout autre liquide biologique exempt de cellules. Les kits permettent une purification fiable de l’ARN et de l’ADN viraux sans contamination croisée. NucleoSpin 96 Virus est principalement conçu pour une utilisation manuelle dans une centrifugeuse. Les kits de base NucleoSpin 96 Virus permettent une plus grande variation et une plus grande flexibilité dans les consommables utilisés pour la lyse, le lavage et l’élution et sont principalement recommandés pour l’utilisation manuelle ou automatisée sous vide. Grâce à la méthode NucleoSpin 96 Virus, les virus à ARN sont rapidement et efficacement lysés par un tampon de lyse – solution de GITC très concentrée. Les virus à ADN (p. ex., VHB) sont généralement plus difficiles à isoler et nécessitent une digestion d’échantillons par protéinase K. Le tampon de lyse et l’éthanol créent des conditions appropriées pour la fixation des acides nucléiques à la membrane de silice des barrettes ou plaques de fixation virale NucleoSpin. L’ARN porteur inclus dans le tampon de lyse améliore la fixation et la récupération de l’ARN/ADN viral faiblement concentré. Les contaminations (inhibiteurs potentiels de la PCR*) comme les sels, métabolites et composants cellulaires macromoléculaires solubles sont éliminées par étapes de lavage avec des tampons de lavage éthanoliques. Les acides nucléiques viraux purifiés peuvent être élués dans un tampon à faible teneur en sel ou dans de l’eau et sont prêts à l’emploi pour des applications ultérieures en aval telles que la RT-PCR* ou la PCR*.
CentrifugationPour le traitement par centrifugation des kits NucleoSpin 8 Virus, une centrifugeuse pour plaque de microtitration est nécessaire pour accueillir les barrettes/plaques NucleoSpin Virus empilées sur un bloc ou rack à puits ronds ou carrés avec des barrettes de tubes et atteint des accélérations de 5 600 à 6 000 x g (hauteur de godet : 85 mm). Pour le traitement par centrifugation des barrettes à 8 puits, le kit de démarrage réutilisable C, contenant les supports de colonne C, des barrettes factices, des blocs à puits carrés MN et des barrettes de tube est nécessaire.
Traitement sous videLes kits de NucleoSpin 96 Virus peuvent être utilisés manuellement avec le collecteur à vide NucleoVac 96. Pour le traitement sous vide des barrettes à 8 puits réutilisables, le kit de démarrage A contenant des supports de colonne A et des barrettes factices est nécessaire. Pour l’automatisation sur les plateformes de laboratoire avec chambres à vide pour plaques à 96 puits standard, l’utilisation du kit de démarrage A est également requise.
Composants du kit : Barrettes de fixation NucleoSpin Virus, blocs à puits carrés MN, racks avec barrettes de tubes, barrettes de bouchons, feuille de métal auto-adhésive, tampons, ARN porteur, protéinase K.
- Technologie à membrane de silice
- Taille des fragments : 100 bp à 30 kb
- Échantillon : 150 μl (100 cp/ml) de sérum, plasma, liquides biologiques exempts de cellules
- Volume d’élution : 70 μl à 100°μl
- Récupération standard : > 90%
- Capacité de liaison : 40 μg
- Temps de préparation : 60 min/plaque
- Format : Plaques de 96 puits
Isolement manuel ou automatisé de l’ARN et de l’ADN viraux à partir de sérum, plasma, liquides biologiques exempts de cellules.