Les rendements élevés sont réalisables en modifiant les conditions typiques de réaction de transcription afin que les concentrations très élevées de nucléotide puissent être utilisées efficacement. Le mélange d’enzymes T7 et le tampon de réaction 10X sont étalonnés spécifiquement pour chaque lot et l’ARN polymérase.
Utilisation du kit MEGAscript T7 : ce kit contient des composants de la réaction de transcription in vitro ainsi qu’un modèle de contrôle. Son rendement atteint un total de 3 à 5 mg d’ARN (environ 100 μg d’ARN ou plus par réaction) à partir du modèle de contrôle fourni avec le kit. Ceci correspond à 400 à 650 mol d’ARN pour chaque mole de modèle. En règle générale, les modèles plus petits produisent une masse inférieure et un rendement molaire supérieur du produit. Les conditions inédites de la réaction de transcription et une technologie brevetée à haut rendement permettent de synthétiser 10 à 50 fois le montant d’ARN produit par les réactions de transcription classiques.Applications : le kit MEGAscript T7 est prévu pour synthétiser de grandes quantités d’ARN non marqué ou avec une faible activité spécifique pour toute une variété d’applications, y compris la traduction in vitro, les études d’antisens / de micro-injections et l’isolement des protéines de liaison à l’ARN. Dans les réactions de transcription à grande échelle, la concentration des quatre nucléotides est élevée, nettement supérieure au Km pour l’enzyme. En règle générale, le kit MEGAscript T7 produit 10 fois plus d’ARN que les réactions de transcription in vitro classiques. Le kit n’est pas recommandé pour synthétiser des sondes à activité spécifique élevée.Produits accessoires : Les kits d’amplification ARNa MessageAmp™ sont alimentés par la technologie MEGAscript et développés spécialement pour l’amplification d’ARNc avant l’analyse de réseau. Pour purifier les produits de la transcription in vitro des nucléotides libres, des composants de tampon et des enzymes, utilisez le kit MEGAclear™ (n° cat. AM1908) et le kit MEGAclear-96 (n° cat. AM1909).Rendement de l’ARN :100 μg
Caractéristiques techniques
| Marque | Invitrogen |
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| Réf. B-LABO | BL-RE-086997 |
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| Réf. fabricant | 10629645 |
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| Contenu et stockage | Le mélange d’enzymes T7, tampon de réaction 10X, solution ATP, solution CTP, solution GTP, solution UTP, solution pTRI-Xef, DNase TURBO, solution d’arrêt d’acétate d’ammonium, solution de précipitation de chlorure de lithium et tampon de chargement de gel II sont tous conservés à –20 °C. L’eau exempte de nucléase peut être conservée à n’importe quelle température. |
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| Type de produit final | ARNm synthétique, ARNm |
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| Format | Kit |
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| Type d’échantillon | ARNm, ARNm synthétique |
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| À utiliser avec (application) | Transcription in vitro, ARNm synthétique, ARNm, transfection, LNP, GENEart, plasmide d’ADN linéarisé, administration, produits de PCR |
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| Nbre de réactions | 25 réactions |
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| Gamme de produits | Ambion™, MEGAscript™ |
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| Type de produit | Kit de transcription in vitro T7 |
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| Quantité | 25 réactions |
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| Accélérateur | T7 |
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| Conditions d’expédition | Glace carbonique |
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| Rendement | 100 µg |
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| Matériau de départ | Produits de PCR, plasmide d’ADN linéarisé |
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