Le kit DecaLabel de marquage de l’ADN à la biotine est un système avancé permettant la synthèse efficace des sondes d’ADN marquées à la biotine, basé sur une méthode de multi-amorçage au hasard améliorée, élaborée par Feinberg et Vogelstein. La principale amélioration par rapport aux kits classiques de multi-amorçage aléatoire concerne l’utilisation d’amorces décamères aléatoires à la place d’amorces hexamères pour garantir une hybridation plus efficace à l’ADN à 37°C. Le kit inclut également un fragment Klenow (exo-). Cette enzyme produite par manipulation génétique ne présente aucune activité exonucléase décelable. L’enzyme ne dégrade pas la sonde marquée au cours de la réaction et permet de nombreux marquages à partir de petites quantités de matrice d’ADN. Vous pouvez marquer uniformément n’importe quelle longueur de fragments d’ADN.
L’ADN marqué à la biotine est détecté à l’aide du kit de détection chromogénique à la biotine ou des systèmes classiques de détection à la biotine-avidine ou à la biotine-streptavidine.
La principale amélioration par rapport aux kits classiques de multi-amorçage aléatoire concerne l’utilisation d’amorces décamères aléatoires à la place d’amorces hexamères pour garantir une hybridation plus efficace à l’ADN à 37 °C. Le fragment de Klenow, exo- est également inclus dans le kit ; cette enzyme produite par manipulation génétique ne présente aucune activité exonucléase décelable. Par conséquent, elle ne dégrade pas la sonde marquée au cours de la réaction et permet de nombreux marquages à partir de petites quantités de matrice. Il est ainsi possible de marquer des fragments d’ADN de n’importe quelle longueur de façon uniforme. L’ADN marqué à la biotine est détecté à l’aide du kit de détection chromogénique à la biotine ou au moyen des systèmes classiques de détection à la biotine-avidine ou biotine-streptavidine.
Points forts
Recommandées dans les cas suivants
Génération de sondes d’ADN marquées à la biotine pour une variété d’expériences d’hybridation non radioactives, notamment les transferts Southern et Northern, les hybridations sur colonies / plaques, les transferts dot / slot et les hybridations in situ
Caractéristiques principales
Marquage non radioactif de l’ADN
Amorçage efficace des réactions de marquage avec des décamères aléatoires
Rendements élevés avec le fragment Klenow, (exo-) : pas de dégradation d’une sonde marquée pendant la réaction
