Le kit de détection chromogénique à la biotine est un outil pratique de détection chromogénique des sondes d’acides nucléiques biotinylées. Le kit est optimisé pour fournir une importante sensibilité reproductible avec un bruit de fond faible dans des applications, telles que les transferts Southern, Northern, dot/slot et le criblage des plaques virales et des colonies bactériennes. La biotinylation des sondes d’ADN/ARN est largement utilisée comme alternative pratique et sans danger au marquage radioactif. La biotine peut être incorporée dans les acides nucléiques selon différentes méthodes enzymatiques ou non-enzymatiques, y compris le kit DecaLabel de marquage de l’ADN à la biotine.
Le kit est optimisé pour fournir une importante sensibilité reproductible avec un bruit de fond faible dans des applications telles que Southern blot, Northern blot, dot / slot blot, ainsi que pour le criblage des plaques virales et des colonies bactériennes. La biotinylation des sondes d’ADN/ARN est largement utilisée comme alternative pratique et sans danger au marquage radioactif. La biotine peut être incorporée dans les acides nucléiques selon différentes méthodes enzymatiques ou non-enzymatiques, y compris le kit DecaLabel de marquage de l’ADN à la biotine. Les sondes biotinylées sont détectées avec la streptavidine couplée à la phosphatase alcaline (AP). Les conjugués streptavidine-AP se lient de manière spécifique et irréversible aux sondes marquées à al biotine. Les sondes sont ensuite visualisées au moyen d’un substrat chromogénique de la phosphatase alcaline (BCIP / NBT), qui produit un précipité de couleur bleue ou violette. Il est donc inutile de passer par un film radiographique ni aucun autre équipement spécifique pour visualiser ce résultat (figure 1). Le kit de détection chromogénique à la biotine inclut un agent de blocage et des tampons de blocage / nettoyage spécialement conçus pour réduire le bruit de fond généralement associé à la détection de la biotine dans les systèmes traditionnels. La membrane en nylon SensiBlot Plus chargée positivement est un composant recommandé de ce système de détection pour garantir la plus haute sensibilité de détection et les bruits de fond les plus faibles.
- Haute sensibilité de détection : 0,03 pg d’ADN homologue lors de l’hybridation ponctuelle avec sonde marquée à la biotine
- Faible bruit de fond grâce à des procédures de nettoyage et de blocage optimisées
- Détection non radioactive : il est donc inutile de passer par un film radiographique ni aucun autre équipement spécifique pour visualiser ce résultat
- Rapide et pratique : composants prêts à l’emploi
Recommandées dans les cas suivants :
Transferts Southern, Northern, dot / slot, screening de plaque ou de colonie.
