Produisez des modèles d’ADN biotinylé pour les méthodes d’hybridation et de détection d’ADN à l’aide d’heptanucléotides aléatoires, de fragments Klenow et de biotines-nucléotides.
Contenu et stockage
Suffisant pour : 10 réactions de marquage de la biotine (chacune avec 100 ng d’ADN) • Mélange d’heptanucléotide (5X), 100 µl • Mélange de désoxynucléotide (5X), 80 µl • Tampon de réaction (10X), 50 µl • Fragment de Klenow, polymérase d’ADN (5 U / µl), 10 µl • ADN de contrôle (250 ng / µl), 5 µl • Acétate d’ammonium (5M), 1 ml • EDTA (0,5 M, pH 8,0), 1 ml • Eau sans nucléases, 1 ml • Biotine-11-dUTP, 20 µl
Stocker tous les composants à -20°C.
Format
Kit
Labeling Target
ADN
Nbre de réactions
10
Gamme de produits
North2South™
Marque
Thermo Scientific
Le kit de biotinylation d’ADN à amorce aléatoire Thermo Scientific™ North2South utilise des heptanucléotides aléatoires, des fragments Klenow et des nucléotides avec biotine pour produire des modèles d’ADN biotinylé pour l’hybridation et des méthodes de détection d’ADN.
Les heptanucléotides aléatoires contenant toutes les séquences possibles sont fixés sur un modèle d’ADN dénaturé. Ils agissent comme amorces pour la synthèse de brins complémentaires par l’ADN polymérase. Les dNTPs biotinylés dans le mélange de réaction sont incorporés dans l’ADN nouvellement synthétisé. Ce protocole produit l’ADN marqué à la biotine de haute activité pour utilisation comme sondes dans les expériences d’hybridation telles que Southern et Northern. Les hybrides qui en résultent peuvent être détectés avec la peroxydase de streptavidine-raifort (HRP).
Points forts
Points clés
Sensibilité maximales : marquages avec le dUTP biotinylé, ce qui optimise la liaison streptavidine-HRP et augmente la sensibilité
Fonctionne avec seulement 100 ng de modèle d’ADN de départ.
Le fragment Klenow sans exonucléases produit des rendements plus élevés.
Chaque réaction donne une sonde suffisante pour environ trois (10 x 10 cm) transferts.
Caractéristiques techniques
Marque
Thermo Scientific
Réf. B-LABO
BL-RE-089832
Réf. fabricant
10229423
Contenu et stockage
Suffisant pour : 10 réactions de marquage de la biotine (chacune avec 100 ng d’ADN)<br>• Mélange d’heptanucléotide (5X), 100 µl<br>• Mélange de désoxynucléotide (5X), 80 µl<br>• Tampon de réaction (10X), 50 µl<br>• Fragment de Klenow, polymérase d’ADN (5 U / µl), 10 µl<br>• ADN de contrôle (250 ng / µl), 5 µl<br>• Acétate d’ammonium (5M), 1 ml<br>• EDTA (0,5 M, pH 8,0), 1 ml<br>• Eau sans nucléases, 1 ml<br>• Biotine-11-dUTP, 20 µl<br><br>Stocker tous les composants à -20°C.
Format
Kit
Labeling Target
ADN
Nbre de réactions
10
Gamme de produits
North2South™
Type de produit
Kit de marquage d’ADN
Quantité
10 réactions
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