Le kit d’isolement d’ARN total MagMAX™-96 pour biopuces est destiné à la purification rapide et à haut débit d’ARN à partir de cellules et de tissus de mammifères dans des plaques à 96 puits. Le kit associe une extraction organique à une purification à base de microbilles magnétiques, générant un ARN de très haute qualité adapté aux applications les plus exigeantes, telles que l’analyse de microarray. Le kit contient suffisamment de réactifs pour 96 réactions. Avantages du kit d’isolement d’ARN total MagMAX™-96 pour biopuces :
• Améliore les études d’expression génétique avec des résultats cohérents d’une expérience à l’autre
• Associe le TRI Reagent™ à la technologie à base de microbilles magnétiques supérieures
• Purification d’ARN rationalisée, sans sacrifier la qualité ou la quantité d’ARN
Points forts
Avantages de la purification à base de microbilles magnétiques MagMAX™
Les microbilles magnétiques offrent de nombreux avantages par rapport à d’autres technologies d’isolement de l’ARN. Les billes assurent une liaison de l’ARN plus efficace que les filtres en fibre de verre et permettent ainsi de produire des volumes d’ARN plus importants et plus homogènes. L’absence de filtre permet également d’éliminer tout risque d’obstruction des filtres causée par des particules cellulaires présentes au sein des échantillons. Comme seul un petit volume de microbilles magnétiques est nécessaire pour la liaison à haute efficacité, l’ARN lié peut être élué dans seulement 20 à 50 µl d’eau exempte de nucléase, concentrant l’ARN à partir de grands échantillons dilués.
Hautement rigoureux pour l’ARN de la meilleure qualité
La procédure pour le kit d’isolement d’ARN total MagMAX™-96 pour biopuces (brevet en attente) associe le TRI Reagent™ de lyse / dénaturant robuste et fiable à la technologie de purification d’ARN à base de microbilles magnétiques MagMAX™, ce qui permet une purification d’ARN rationalisée, même dans un format à haut débit, sans sacrifier la quantité ou la qualité d’ARN. TRI Reagent™ lyse facilement même les cellules et les tissus difficiles tout en dénaturant les nucléases pour maintenir l’intégrité de l’ARN. Le kit fournit des rendements élevés d’ARN pur et intact qui peuvent être utilisés directement pour la PCR quantitative après transcriptase inverse (qRT-PCR) et l’analyse de microarray. Consultez les données qui l’accompagnent pour connaître le rendement et la qualité de l’ARN obtenus lors de l’utilisation du kit d’isolement d’ARN total MagMAX™-96 pour biopuces. Les données illustrant également une forte corrélation entre la méthode qu’Affymetrix recommande pour produire de l’ARN pour une utilisation sur ses GeneChips™ et la méthode utilisée par le kit MagMAX™-96 pour les biopuces.
Procédure rapide et flexible
Deux protocoles alternatifs sont fournis pour le kit. La méthode “Spin” comporte moins d’étapes, ne nécessite aucun traitement DNase et permet de traiter des quantités d’échantillons plus importantes. La méthode “No Spin” nécessite moins de manipulation des échantillons et peut être facilement intégrée à un manipulateur de liquides robotisé. La procédure est rapide (moins d’une heure), simple et bien adaptée à l’automatisation. Le kit peut également être utilisé pour traiter moins de 96 échantillons à la fois et est compatible avec le traitement manuel à l’aide de pipettes multicanaux ou avec le traitement de liquides robotisés. Des protocoles téléchargeables pour l’utilisation de ce kit avec des systèmes de manipulation de liquides spécifiques sont disponibles sur notre ressource d’automatisation.
Produits accessoires
Un support à anneau magnétique à 96 puits est nécessaire pour utiliser ce kit. Le support magnétique-96 (n° de cat. AM10027) et le support à anneau magnétique à 96 puits (n° de cat. AM10050) sont conçus pour la précipitation de microbilles paramagnétiques à partir de microplaques à fond en U à 96 puits standard. Le support en anneau magnétique organise les microbilles magnétiques en forme de cercle, ce qui facilite le retrait du surnageant par un robot ou des pipeteurs multicanaux. Pour les plaques de traitement supplémentaires, les plaques en polypropylène à fond en U à 96 puits Matrix (Thermo Scientific, article n°4917) sont recommandées.
Caractéristiques techniques
| Marque | Invitrogen |
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| Réf. B-LABO | BL-RE-089912 |
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| Réf. fabricant | 10043277 |
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| Contenu et stockage | <b>Contenu du kit (stockage) :</b><br>• 1 plaque de traitement et couvercle (température ambiante)<br>• 12 ml de concentrat de solution de lyse / liaison (température ambiante)<br>• 18 ml de concentrat de solution de lavage 1 (température ambiante)<br>• 72,5 ml de concentrat de solution de lavage 2 (température ambiante)<br>• 14 ml de tampon d’élution (température ambiante)<br>• 6 ml de tampon de DNase MagMAX™ TURBO™ (4°C ou température ambiante)<br>• 4 TRI Reagent™ de 25 ml (4°C)<br>• 1,1 ml de microbilles de liaison à l’ARN (4°C)<br>• 1,1 ml de séquence activatrice de lyse / liaison (-20°C)<br>• 215 µl de DNase TURBO™, 10 U / µl (-20°C)<br><br>Contient suffisamment de réactifs pour isoler l’ARN des 96 échantillons. |
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| Format | Plaque à 96 puits |
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| Isolation Technology | Microbille magnétique, Extraction organique |
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| Temps de purification | < 1 heure |
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| Type d’échantillon | Cellules, cellules de mammifères, échantillons végétaux, tissus (mammifères), levure, cellules de mammifères, échantillons végétaux, tissus (mammifères), levure |
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| Type de produit final | ARN total |
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| Compatibilité à haut débit | Compatibilité avec haut débit, protocoles automatisés |
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| À utiliser avec (équipement) | Systèmes de manipulation de liquides robotiques MagMAX™ Express 24 et 96, processeur de particules magnétiques standard MagMAX™ Express-96 |
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| À utiliser avec (application) | Analyse microarray, PCR quantitative en temps réel (qPCR), PCR par transcriptase inverse (RT-PCR), transfert Northern |
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| Nbre de réactions | 96 préparations |
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| Gamme de produits | Ambion™, MagMAX™ |
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| Quantité de matériel de démarrage | Jusqu’à 5 x 10^6 cellules, jusqu’à 100 mg de tissu |
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| Target | ARN total |
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