Le kit RNAqueous™-Micro est utilisé pour isoler l’ARN total sans phénol à partir de micro-échantillons (p. ex. à partir de moins de 500 000 cellules de culture, à peine 10 cellules microdisséquées par capture laser ou ≤10 mg de tissus) à l’aide d’une lyse / d’un dénaturant à base de guanidinium et de la technologie de séparation des filtres en fibre de verre. Les réactifs d’élimination de l’ADN DNA-
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™sont inclus dans le kit, rendant ainsi l’ARN isolé particulièrement pratique pour la PCR en temps réel. Ce kit fournit ce qui suit :
• ARN hautement concentré : sensibilité accrue dans les dosages en aval
Points forts
Fonctionnement
Les échantillons sont solubilisés dans une solution chaotropique puissante et l’ARN est purifié sur une cartouche de filtre en fibre de verre spécialement conçue pour de très petits échantillons. Une simple modification du protocole permet de récupérer les espèces d’ARN de grande et de petite tailles, y compris les ARNt, l’ARNr 5S et les micro-ARN. L’ARN est élué dans un volume minimal de 20 µl. L’ADN génomique résiduel est éliminé efficacement à l’aide du système DNA-
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Caractéristiques techniques
| Marque | Invitrogen |
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| Réf. B-LABO | BL-RE-089924 |
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| Réf. fabricant | 10516945 |
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| Contenu et stockage | • 50 cartouches filtrantes avec tubes de prélèvement ; conserver à température ambiante<br />• 50 tubes d’élution (1,5 ml) ; température ambiante<br />• 15 ml de solution de lavage 1 (concentrée) ; température ambiante<br />• 28 ml de solution de lavage 2/3 (concentrée) ; 4°C<br />• 25 ml de solution de lyse ; 4°C<br />• 200 µl d’additif de microdissection par capture laser ; -20°C<br />• 55 µl de DNase ; -20°C<br />• 600 µl de tampon de DNase I 10X ; -20°C<br />• 150 µl de réactif d’inactivation DNase ; -20°C<br />• 5 ml de solution d’élution ; température ambiante |
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| Isolation Technology | Colonne de centrifugation de silice |
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| Temps de purification | 15 min. (Après homogénéisation des échantillons) |
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| Volume d’élution | 10 à 20 μl |
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| Type d’échantillon | Échantillons de cellules, de tissus, de microdissection par capture laser, microdissection par capture laser (LCM), Échantillons de microdissection par capture laser (LCM) |
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| Type de produit final | ARN total |
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| Compatibilité à haut débit | Non compatible avec des cadences élevées (manuel) |
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| À utiliser avec (application) | RT-PCR, qPCR, construction de bibliothèques d’ADNc, NGS, analyse microarray, hybridation de transfert, transfert Northern, traduction in vitro, dosages de protection de nucléases, marquage des acides nucléiques |
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| Quantité | 50 Preps |
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| Conditions d’expédition | Boîte 1 : Glace<br>Boîte 2 : Température ambiante |
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| Quantité de matériel de démarrage | Cellules : ≤10<sup>5</sup><br>Tissus : ≤ 10 mg |
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