- S’appuie sur la génération de baculovirus recombinant par transposition spécifique au site dans E. coli plutôt que la recombinaison homologue dans les cellules d’insectes
- Bacmide d’expression à gain de temps : la cassette d’expression du vecteur pFastBac se recombine avec le bacmide parent dans E. coli DH10Bac
- Cellules compétentes pour former le bacmide d’expression
- Le bacmide est ensuite transfecté dans des cellules d’insectes pour la production de particules de baculovirus recombinantes
- Sélection facile des colonies :
- Le bacmide parent dans E. coli DH10Bac contient un segment du gène lacZα
- Le gène lacZα est perturbé lors de la transposition de la cassette d’expression dans le bacmide permettant la sélection bleue / blanche des recombinants
- Flexibilité
- Livré avec le vecteur pFastBac1 qui offre un promoteur de polyédrine fort pour l’expression des protéines et un grand site de clonage multiple pour un clonage simplifié
- Deux autres vecteurs sont proposés séparément
- Vecteur pFastBacHT pour la production de protéines recombinantes marquées à l’histidine et vecteur pFastBacDual pour l’expression simultanée de deux protéines
- Purification rapide des protéines recombinantes
- Le vecteur pFastBacHT en option produit des protéines recombinantes marquées à l’histidine pour une purification rapide des protéines avec de la résine de chélation au nickel
Production et titration de baculovirus, Expression des insectes, Expression des protéines, Protéines, Expression, Isolement et analyse