Kit ELISA sandwich
Kit is designed to detect and quantify the level of AKT (Total) in fresh or frozen human cell lysates. Cross-reactivity in mouse and rat cell lysates has been observed. The assay recognizes both natural and recomb. AKT (Total), independent of its phosphorylation state. Principle of the method A monoclonal capture antibody specific for AKT (Total) has been coated onto the wells of 96-well plate. During the first incubation, standards of known content and unknown samples are pipetted into the wells and the antigen binds to the immobilized (capture) antibody. After washing, a rabbit antibody specific for the target protein is added to the wells and serves as a detection antibody by binding to the immobilized protein captured during the first incubation. After washing, a HRP labeled anti-rabbit IgG is added. This binds to the detection antibody to complete the four member sandwich. After a third incubation and washing to remove all the unbound enzyme, a substrate solution (TMB) is added, which is acted upon by the bound enzyme to produce color. The intensity of this colored product is directly proportional to the concentration of target protein present in the original specimen and the optical density can be read on a standard microplate reader. Rigorous validation Each manufactured lot of this ELISA kit is quality tested for criteria such as sensitivity, specificity, precision, and lot-to-lot consistency. See manual for more information on validation.
L’AKT (protéine kinase B, PKB, RAS-alpha) est une kinase sérine/thréonine de 57 kDa qui joue un rôle important dans diverses réponses biologiques telles que la régulation du métabolisme, la survie cellulaire et la croissance par phosphorylation de plusieurs protéines. L’AKT est activée par l’insuline, le PI3K, l’IGF1 et divers autres facteurs de croissance et de survie. L’AKT favorise la survie cellulaire en inhibant l’apoptose par phosphorylation et inactivation de plusieurs cibles, y compris les facteurs de transcription Forkhead et la caspase-9. Il existe trois isoformes d’AKT chez les mammifères : AKT1 (PKB alpha), AKT2 (PKB bêta) et AKT3 (PKB gamma), avec AKT2 et AKT3 étant approximativement identiques à 82 % à l’isoforme AKT1. Chaque isoforme possède un domaine d’homologie à la pleckstrine (PH), un domaine kinase et un domaine de régulation carboxy-terminal. L’AKT a été initialement cloné à partir du rétrovirus AKT8. Il s’agit d’un régulateur clé de nombreuses voies de transduction de signal. La voie AKT est une cible majeure pour les thermogènes du cancer pour laquelle le dysfonctionnement de la signalisation AKT a été impliqué dans de nombreux types de cancer, notamment les syndromes de cancer connus sous le nom de “phacomatoses”.
Conditions d’expédition : Glace humide
| Marque | Invitrogen |
|---|---|
| Réf. B-LABO | BL-RE-090368 |
| Réf. fabricant | 10364403 |
| Numéro d’adhésion | P31749,P31750,P31751,P47196,P47197,Q60823,Q63484,Q9WUA6,Q9Y243 |
| Plage de dosage | 0,3-20 ng/ml |
| Sensibilité du dosage | <0,1 ng |
| Concentration | 0,3 à 20 ng/ml |
| Conjugué | HRP |
| Type de produit | Kit ELISA |
| Type d’échantillon | Lysats cellulaires |
| Type de substrat | Sérine/thréonine kinases |
| Espèces cibles | Souris, rat |
| À utiliser avec (équipement) | Lecteur de microplaques colorimétriques |
| Identification génétique (Entrez) | 10000, 11651, 11652, 207, 208, 23797, 24185, 25233, 29414 |
| Symbole de gène(s) | AKT,CWS6,PKB,PKB-ALPHA,PRKBA,RAC,RAC-ALPHA,HIHGHH,PKBB,PKBBETA,PRKBB,RAC-BETA,MPPH,MPPH2,PKB-GAMMA,PKBG,PRKBG,RAC-PK-gamma,RAC-gamma,STK-2 |
| Temps d’incubation | 4 h |
| Coefficient de variation inter-dosage | 9,3% |
| Coefficient de variation intra-dosage | 7,7% |
| Contenus des kits | Plaque à 96 puits pré-enduite, Étalon, Tampon de dilution standard, Détection d'anticorps, Anti-lapin HRP, Diluant HRP, Tampon de lavage, Chromogène, Solution d’arrêt, Couvercles de plaques adhésives |
| Marqueur ou colorant | HRP |
| Marqueur génétique | Akt |
| Quantité | 96 tests |
| État réglementaire | RUO |
| Volume d’échantillon | Lysat cellulaire ,10 μl |
| Conditions de stockage | 2°C à 8°C |
| Cible | Humain, souris et rat |
| Heure du test | 1 h 20 min |
| Durée totale du dosage | 4 h |
