The 2',3'-Cyclic GAMP Competitive ELISA Kit quantitates 2',3'-cyclic GAMP in lysed cells and tissue, tissue culture media, and EDTA plasma.∣Principle of the method: The 2',3'-Cyclic GAMP Competitive ELISA research-use-only kit is designed to quantitatively measure 2',3'-cyclic GAMP independent of species. A 2',3'-cyclic GAMP standard is provided to generate a standard curve for the assay and all samples are read off a user-generated standard curve. Standards or diluted samples are pipetted into a clear microtiter plate coated with anti-rabbit IgG antibodies. Anti-rabbit 2',3'-cyclic GAMP antibodies and 2',3'-cyclic GAMP-peroxidase conjugate is added to the wells. The 2',3'-cyclic GAMP-peroxidase conjugate and any 2',3'-cyclic GAMP in the sample will compete to bind to the anti-rabbit 2',3'-cyclic GAMP antibodies. After incubation, the plate is washed and substrate is added. The substrate reacts with the bound 2',3'-cyclic GAMP-peroxidase conjugate. After a 30 min incubation, the reaction is stopped and the intensity of the generated color is detected in a microtiter plate reader at 450 nm. The intensity of the generated color corresponds inversely to the amount of 2',3'-cyclic GAMP present in the sample.∣Rigorous validation: Each manufactured lot of this ELISA kit is quality tested for criteria such as sensitivity, specificity, precision, and lot-to-lot consistency. See manual for more information on validation.
La synthase (CGAs) GMP-AMP cyclique (cGAMP) est une nucléotidyltransférase située dans le cytosol qui agit comme un capteur d’ADN cytosolique pour détecter l’ADN étranger provenant d’agents pathogènes microbiens dans le cadre de la réponse immunitaire innée.Lors de la liaison à l’ADN cytosolique, les CGA produisent le second messager cystinucléotide cyclique cGAMP, qui active le stimulateur des gènes de l’interféron (piqûre), conduisant à l’activation de la voie de l’interféron de type I (IFN).In vitro, les fibroblastes, les macrophages et les cellules dendritiques isolées des souris à knockout CGAs (CGAs-/-) ne produisent pas d’IFM de type I suite à une transfection d’ADN ou à une infection par le virus de l’ADN.De même, les cellules contenant une mutation par décalage de trame dans le locus des CGA ne parviennent pas à monter une réponse immunitaire au VIH et à d’autres rétrovirus.In vivo, les souris CGA-/- infectées par le virus herpès simplex 1 (HSV-1) présentent des niveaux plus faibles d’IFNα - et d’IFN-β, des temps de survie plus courts et des niveaux post-mortem plus élevés de HSV-1 dans le cerveau.
Caractéristiques techniques
| Marque | Invitrogen |
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| Réf. B-LABO | BL-RE-090413 |
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| Réf. fabricant | 17174853 |
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| Numéro d’adhésion | 2'3 '-GMP-AMP cyclique ; cGAMP ; guanosine-adénosine 2 ',3 '-monophosphate cyclique |
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| Plage de dosage | 0,04 |
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| Sensibilité du dosage | 0,08-20 pmol/ml |
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| Conjugué | HRP |
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| Type de produit | ELISA |
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| À utiliser avec (équipement) | Lecteur de microplaques colorimétriques |
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| Coefficient de variation inter-dosage | 8% |
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| Coefficient de variation intra-dosage | 6% |
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| Contenus des kits | Plaque de 96 puits revêtue d’anti-IgG<br>Étalon<br>Concentrat de tampon de dosage<br>Anticorps de capture<br>Antigène conjugué à la HRP<br>Concentrat de tampon de lavage<br>Substrat de TMB<br>Solution d’arrêt<br>Thermoscelleur pour plaques |
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| Marqueur ou colorant | HRP |
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| Quantité | 96 dosages |
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| État réglementaire | Usage exclusivement réservé à la recherche |
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| Volume d’échantillon | Lysat cellulaire , 50 µl ; homogénat tissulaire, 50 µl ; surnageant, 50 µl ; plasma, 10 µl |
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| Conditions de stockage | -20°C |
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| Cible | cGAMP |
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| Heure du test | 45 min |
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| Durée totale du dosage | 2 h 30 min |
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