Le kit d’activité de la superoxyde dismutase, à usage de recherche uniquement, est un test d’activité colorimétrique conçu pour la quantification et la détection de l’activité de la superoxyde dismutase dans le sérum, le plasma, les cellules, les tissus et les lysats érythrocytaires.Ce kit complet prêt à l’emploi comprend une ou plusieurs plaques transparentes à 96 puits, un étalon de superoxyde dismutase (1 unité/flacon), un substrat de superoxyde dismutase et d’autres composants pour effectuer le dosage. Ce kit nécessite l’utilisation d’un lecteur de microplaques à 96 puits capable de lire la densité optique à 450 nm.Caractéristiques de performance• Type de dosage : kit d’activité colorimétrique• Types d’échantillons : sérum, plasma, cellules, tissus et lysats érythrocytaires• Sensibilité : 0,044 U/ml• Plage de la courbe standard : 0,06–4 U/ml• Réactivité : indépendante de l’espèceContexteLes dérivés de l’oxygène à vie courte et hautement réactifs (DRO), tels que le superoxyde, le radical hydroxyle et le peroxyde d’hydrogène, sont générés en continu in vivo. À l’état de repos, l’équilibre entre les antioxydants et les oxydants est suffisant pour empêcher la perturbation des fonctions physiologiques normales ; cependant, soit l’augmentation des oxydants, soit la baisse des antioxydants peuvent perturber cet équilibre donnant lieu à des niveaux élevés de dérivés réactifs de l’oxygène (DRO). Les niveaux cellulaires des DRO sont contrôlés par des enzymes antioxydantes et des antioxydants à petite molécule. Les principales enzymes antioxydantes, les superoxyde dismutase (SOD), y compris la superoxyde dismutase cuivre-zinc (Cu/ZnSOD, SOD1), la superoxyde dismutase manganèse (MnSOD, SOD2) et la superoxyde dismutase extracellulaire (EC-SOD, SOD3), jouent toutes des rôles critiques dans l’élimination du superoxyde.Une diminution de l’activité de la SOD entraîne une élévation du niveau de superoxyde qui, à son tour, entraîne une diminution des concentrations en oxyde nitrique (NO) mais une augmentation des concentrations de peroxynitrite. La principale SOD intracellulaire est un cuivre 32kD et un zinc contenant un homodimère (SOD Cu/Zn). La SOD mitochondriale (MnSOD) est un homotétramère 93kD contenant du manganèse qui est synthétisé dans le cytoplasme et transféré à la matrice interne des mitochondries. Ce dosage a été validé pour les échantillons de sérum et d’urine. Les superoxydes dismutase sont des enzymes anciennes qui doivent se comporter de la même manière que le substrat colorimétrique. Ce dosage doit mesurer l’activité des SOD à partir d’un large éventail de sources.Principe du dosageLe kit d’activité de la superoxyde dismutase est conçu pour mesurer quantitativement l’activité SOD dans une variété d’échantillons. Le dosage mesure tous les types d’activité SOD, y compris les types Cu/Zn, Mn et FeSOD. Un étalon de SOD d’érythrocytes bovins est fourni pour générer une courbe d’étalonnage pour le dosage et tous les échantillons doivent être lus à partir de la courbe d’étalonnage. Les échantillons sont dilués dans notre diluant d’échantillon spécialement coloré et ajoutés aux puits. Le substrat est ajouté, suivi du réactif xanthine oxydase et incubé à température ambiante pendant 20 minutes. La xanthine oxydase génère du superoxyde en présence d’oxygène, ce qui convertit un substrat incolore dans le réactif de détection en un produit de couleur jaune. Le produit coloré est lu à 450 nm. L’augmentation des niveaux de SOD dans les échantillons entraîne une diminution de la concentration de superoxyde et une réduction du produit de couleur jaune.Définition de l’unité SODUne unité de SOD est définie comme la quantité d’enzyme provoquant la moitié de l’inhibition maximale de la réduction de 1,5 mM de tétrazolium bleu nitro en présence de riboflavine à 25°C et à un pH de 7,8.
Caractéristiques techniques
| Marque | Invitrogen |
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| Réf. B-LABO | BL-RE-090506 |
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| Réf. fabricant | 15665069 |
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| Contenu et stockage | Plaque(s) à 96 puits, standard, réactif de détection, tampon de dosage, substrat et fiche technique spécifique au lot.<br><br>Stocker à –20°C. |
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| Format du kit d’immunoessai | Kit d’activités |
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| À utiliser avec (équipement) | Lecteur de microplaques |
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| Quantité | 2 x 96 tests |
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| Conditions d’expédition | Homologué pour des expéditions sur de la glace carbonique ou mouillée |
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| Kit cible nommé | Superoxyde dismutase (SOD) |
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