ELISA compétitif
L’ELISA de prostaglandine E2 humaine (Hu PGE2) quantifie l’Hu PGE2 dans le sérum humain, le sang total, la salive, l’urine ou le milieu de culture cellulaire. Le test reconnaîtra exclusivement le Hu PGE2 naturel et recombinant. Principe de la méthode L’ELISA sandwich en phase solide de PGE2 humain (essai immuno-enzymatique) est conçu pour mesurer la quantité de la cible liée entre une paire d’anticorps appariée. Un anticorps spécifique à la cible a été prérevêtu dans les puits de la microplaque fournie. Les échantillons, étalons ou témoins sont ensuite ajoutés à ces puits et se lient à l’anticorps immobilisé (capture). Le sandwich est formé par l’ajout du second anticorps (détecteur), une solution de substrat qui réagit avec le complexe enzyme-anticorps-cible pour produire un signal mesurable. L’intensité de ce produit coloré est inversement proportionnelle à la concentration de TP (p) présente dans l’échantillon d’origine. Validation rigoureuse Chaque lot fabriqué de ce kit ELISA voit sa qualité testée pour des critères tels que la sensibilité, la spécificité, la précision et la constance de lot à lot. Consultez le manuel du produit pour plus d’informations concernant la validation.
La prostoglandine E2 (PGE2) est un puissant médiateur lipidique produit par le métabolisme de l’acide arachidonique via la voie de la cyclooxygénase (COX). Suite à une stimulation cellulaire, l’acide arachidonique est hydrolysé à partir des phospholipides stockés par l’une des enzymes phospholipase A2 et converti en PGH2 endoperoxyde instable par COX 1 ou COX 2. PGH2 est isomérisé en PGE2 par l’une des 3 enzymes distinctes PGES 1 microsomiques (mPGES 1), mPGES 2, ou une enzyme cytosolique, cPGES. La PGE2 est actif dans un certain nombre de systèmes et de milieux physiologiques, notamment l’inflammation, la régulation immunitaire, la génération de fièvre, la perception de la douleur, la protection du muscosa gastrique, la fertilité et la parturition, ainsi que la rétention de sodium et d’eau. Les effets de la PGE2 sont transduits par 4 des sous-types de récepteurs couplés aux protéines G désignés EP1, EP2, EP3, EP4, avec des valeurs Kd pour la PGE2 allant de 1 à 10 nM. La PGE2 est rapidement métabolisé in vivo par la voie de la prostaglandine 15 déshydrogénase (15 hydroxy PGDH) en métabolite inactif 13,14 dihydro 15 céto PGE2. La demi-vie de la PGE2 dans le système circulatoire est de ∽30 secondes et les concentrations plasmatiques normales sont de 3 à 12 pg/ml.
| Marque | Invitrogen |
|---|---|
| Réf. B-LABO | BL-RE-090512 |
| Réf. fabricant | 10188493 |
| Plage de dosage | 39,1-2500 pg/ml |
| Sensibilité du dosage | 13,4 pg/ml |
| Conjugué | AP |
| Format du kit d’immunoessai | ELISA colorimétrique (substrat de p-NPP) dans des plaques à 96 puits claires |
| Type de produit | Kit ELISA |
| Type d’échantillon | Salive, Sang total, Sang total, Sérum, Surnageant |
| Spécificité | Aucune réaction croisée significative avec 13,14-dihydro-15-keto-PGF2a ; 6,15-keto-13-dihydro-PGF1a ; thromboxane B2 ; 2-Arachidonoylglycérol ; anandamide ; PGD2 ; acide arachadonique. Moins de 1 % de réaction croisée avec PFG2a; 6-keto-PGF1a ; PGA2; PGB1 ; environ 16 % de réaction croisée |
| Suffisant pour | 96 puits de microplaques |
| Espèces cibles | Humaine |
| À utiliser avec (équipement) | Lecteur de microplaques colorimétriques |
| Coefficient de variation inter-dosage | 4% |
| Coefficient de variation intra-dosage | 10,7% |
| Contenus des kits | Plaque à 96 puits pré-enduite, Étalon, Diluant de dosage, Détection d'anticorps, Conjugué de PA, Tampon de lavage, Chromogène, Solution d’arrêt, Couvercles de plaques adhésives, Détection d’anticorps PGE2, 6 ml |
| Marqueur ou colorant | AP |
| Mesure | Absorbance à 405 nm moins absorbance à 570 nm |
| Précision | Selon le type et le niveau d’échantillon |
| Quantité | 96 tests |
| État réglementaire | RUO |
| Volume d’échantillon | Salive, 10 μl ; sérum, 10 μl ; surnageant, 100 μl ; urine, 10 μl ; sang total, 10 μl |
| Conditions de stockage | -20°C |
| Cible | Humaine |
| Heure du test | 1 h 20 min |
| Durée totale du dosage | 2 h 45 min |
