Kit ELISA non revêtu
Le kit ELISA non revêtu TNF-alpha équin contient des paires d’anticorps et des réactifs préappariés pour effectuer des essais immuno-enzymatiques (ELISA) afin de détecter et de quantifier les niveaux de protéines de TNF-alpha équin. Principe de la méthode Les ELISA sont conçus pour mesurer la quantité de la cible liée entre une paire d’anticorps appariée. Un anticorps spécifique à la cible est revêtu au fond des puits d’une microplaque ; il s’agit d’un procédé de nuit. Les échantillons, étalons ou témoins sont ensuite ajoutés à ces puits et se lient à l’anticorps immobilisé (capture). Un sandwich est formé par l’ajout du second anticorps (détecteur), une solution de substrat qui réagit avec le complexe enzyme-anticorps-cible pour produire un signal mesurable. L’intensité de ce produit coloré est directement proportionnelle à la concentration de TP (p) présente dans l’échantillon d’origine.
Le facteur de nécrose tumorale est une cytokine polypeptidique produite par les monocytes et les macrophages. Il fonctionne comme un modulateur multipuissant de la réponse immunitaire et agit en outre comme un puissant pyrogène. Le TNF-alpha circule dans tout le corps en réponse aux stimuli (agents infectieux ou lésions tissulaires), en activant les neutrophiles, en modifiant les propriétés des cellules endothéliales vasculaires, en régulant les activités métaboliques d’autres tissus, ainsi qu’en présentant une activité tumoricide en induisant la coagulation sanguine localisée. Le TNF-alpha inhibe également l’activité lipoprotéique de la lipase, ce qui entraîne une cachexie, une condition physique de dépérissement. L’activation des cellules B par le virus d’Epstein Barr peut être inhibée par le TNF-alpha. En raison de ses diverses actions dans l’ensemble du système immunitaire, le TNF alpha peut jouer un rôle dans la pathogenèse de nombreux états pathologiques. La production de TNF alpha est médiée par l’action des lymphokines et des endotoxines sur le macrophage. Les monocytes purifiés produisent du TNF alpha dans les quatre heures suivant la stimulation par l’IL-2 recombinant et il existe des preuves in vitro permettant de suggérer que le TNF alpha est exprimé à des niveaux élevés et avec une cinétique prolongée dans les cellules T stimulées par CD2 et CD28. La sécrétion de TNF alpha est améliorée par l’interféron gamma. Le TNF induit ou améliore ensuite la production spécifique de l’antigène MHC de classe I, du GM-CSF et de l’IL-1.
| Marque | Invitrogen |
|---|---|
| Réf. B-LABO | BL-RE-092251 |
| Réf. fabricant | 10351154 |
| Numéro d’adhésion | P29553 |
| Plage de dosage | 15,6-1000 pg/ml |
| Sensibilité du dosage | <15,6 pg/ml |
| Conjugué | Biotine |
| Format du kit d’immunoessai | ELISA colorimétrique (substrat de TMB) pour microplaques de 96 puits |
| Type de produit | Kit ELISA |
| Type d’échantillon | Sérum, Surnageant |
| Spécificité | Aucune réaction croisée significative avec le TNFa de bovins, de souris ou de rats. Une réaction croisée partielle se produit avec le TNFa humain et porcin (< 10%) |
| Suffisant pour | 5 x 96 puits de microplaques |
| Espèces cibles | Equin(e) |
| À utiliser avec (équipement) | Lecteur de microplaques colorimétriques |
| Identification génétique (Entrez) | 100033834 |
| Symbole de gène(s) | TNF-a,TNF-alpha,TNFA,TNFSF2 |
| Contenus des kits | Anticorps capteurs, Étalon recombinant lyophilisé, Détection d'anticorps, Streptavidine HRP, Solution de substrat, Solution d’arrêt prête à l’emploi, 0,16 M d’acide sulfurique, Certificat d’analyse : Instructions spécifiques au lot pour la dilution des anticorps et des étalons |
| Marqueur ou colorant | HRP |
| Mesure | Absorbance à 450 nm moins absorbance à 550 nm |
| Précision | CV intra-dosage <10 % ; CV inter-dosage <10 % |
| Quantité | 5 x 96 tests |
| État réglementaire | RUO |
| Volume d’échantillon | Sérum, 100 μl ; surnageant, 100 μl |
| Conditions de stockage | 2°C à 8°C |
| Cible | Equin(e) |
| Heure du test | 24 h |
| Durée totale du dosage | 2 h 50 min |
