Kit ELISA sandwich
Kit is designed to detect and quantify the level of AMPK alpha-1,2 (Phospho) [pT172] in fresh or frozen human cell lysates. Cross-reactivity has been observed in mouse and rat cells. The assay recognizes both natural and recomb. human AMPK alpha-1,2 (Phospho) [pT172]. Principle of the method A monoclonal capture antibody specific for AMPK alpha-1,2 (Phospho) [pT172] has been coated onto the wells of 96-well plate. During the first incubation, standards of known content and unknown samples are pipetted into the wells and the antigen binds to the immobilized (capture) antibody. After washing, a rabbit antibody specific for the target protein is added to the wells and serves as a detection antibody by binding to the immobilized protein captured during the first incubation. After washing, a HRP labeled anti-rabbit IgG is added. This binds to the detection antibody to complete the four member sandwich. After a third incubation and washing to remove all the unbound enzyme, a substrate solution (TMB) is added, which is acted upon by the bound enzyme to produce color. The intensity of this colored product is directly proportional to the concentration of target protein present in the original specimen and the O.D. can be read on a standard microplate reader. Rigorous validation Each manufactured lot of this ELISA kit is quality tested for criteria such as sensitivity, specificity, precision, and lot-to-lot consistency. See manual for more information on validation.
L'AMPK est un complexe hétérotrimérique comprenant une sous-unité alpha catalytique et des sous-unités bêta et gamma régulatrices. Il protège les cellules contre les contraintes qui provoquent l'épuisement de l'ATP en désactivant les voies biosynthétiques consommatrices d'ATP. L'AMPK est activée par l'AMP élevé et l'ATP faible par un mécanisme impliquant une régulation allostérique, la promotion de la phosphorylation par une protéine kinase en amont appelée AMPK kinase et l'inhibition de la déphosphorylation. L'AMPK activée peut phosphoryler et réguler la réductase in vivo de l'hydroxyméthylglutaryl-CoA et de l'acétyl-CoA carboxylase, qui sont les principales enzymes régulatrices de la synthèse du stérol et de la synthèse des acides gras, respectivement. 12548552Les gènes humains AMPK alpha et AMPK alpha codent respectivement des acides aminés et des protéines d'acides aminés. L'AMPK bêta humaine1 code une271 protéine d'acides aminés et l'AMPK bêta humaine2 code une272 protéine d'acides aminés. Le1 gène gamma AMPK humain code une331 protéine d'acides aminés. Les2 gamma AMPK humains et les gamma AMPK ,3569492 qui sont respectivement des protéines et des acides aminés, contiennent des domaines N-terminaux uniques et peuvent participer directement à la liaison de l'AMP au sein du complexe AMPK.
Conditions d’expédition : Glace humide
| Marque | Invitrogen |
|---|---|
| Réf. B-LABO | BL-RE-092254 |
| Réf. fabricant | 10048712 |
| Numéro d’adhésion | P54645, P54646, Q09137, Q13131, Q5EG47, Q8BRK8 |
| Plage de dosage | < 1 U/ml |
| Sensibilité du dosage | < 1 U/mL |
| Concentration | 1,6 U/ml |
| Conjugué | HRP |
| Type de produit | Kit ELISA |
| Type d’échantillon | Lysats cellulaires |
| Type de substrat | Sérine/thréonine kinases |
| Espèces cibles | Souris, rat |
| À utiliser avec (équipement) | Lecteur de microplaques colorimétriques |
| Identification génétique (Entrez) | 105787 ; 108079 ; 5562 ; 5563 ; 65248 ; 78975 |
| Symbole de gène(s) | AMPK,AMPK2,AMPKa2,PRKAA,AMPK,AMPKa1 |
| Temps d’incubation | 4 h |
| Coefficient de variation inter-dosage | 7,6% |
| Coefficient de variation intra-dosage | 4,8% |
| Contenus des kits | Plaque à 96 puits pré-enduite, Étalon, Tampon de dilution standard, Détection d'anticorps, Anti-lapin HRP, Diluant HRP, Tampon de lavage, Chromogène, Solution d’arrêt, Couvercles de plaques adhésives |
| Marqueur ou colorant | HRP |
| Marqueur génétique | AMPK |
| Quantité | 96 tests |
| État réglementaire | RUO |
| Volume d’échantillon | Lysat cellulaire ,10 μl |
| Conditions de stockage | 2°C à 8°C |
| Cible | Humain, souris et rat |
| Heure du test | 1 h 20 min |
| Durée totale du dosage | 4 h |
